Как правильно определить спряжение – три простых шага | Пиши правильно!

Делаете ли вы уроки с ребенком, пишете ли деловое письмо, готовитесь ли к выступлению и оформляете презентацию — вам необходимо уметь правильно определять спряжение. Ведь от спряжения зависит, какое окончание писать в личных формах глаголов. Вы, конечно, помните, что в окончаниях глаголов 1 спряжения пишется Е, второго – И. Если путаете, то легко запомнить такую картинку:

Нет никакой сложности, определить спряжение глагола с ударным окончанием в личной форме. Видишь, под ударением Е – 1 спряжение, И – 2 спряжение. Например, кладЕшь – 1 спряжение, сидИшь – 2 спряжение.

Сложнее обстоит дело у глаголов с безударными личными окончаниями. У таких глаголов спряжение определяется по инфинитиву (начальной форме). Чтобы найти начальную форму глагола, просто задайте вопрос: что делать / что сделать?

Примеры глаголов в начальной форме: спать, сидеть, ждать.

Здесь нужно запомнить, что ко второму спряжению относятся:

все глаголы на –ить (кроме брить, стелить),

7 глаголов на –еть: вертеть, смотреть, видеть, ненавидеть, зависеть, обидеть, терпеть,

4 глагола на –ать: гнать, держать, слышать, дышать.

Проще всего запомнить так:

Гнать, держать,

Смотреть и видеть,

Дышать, слышать, ненавидеть,

И зависеть, и вертеть,

И обидеть, и терпеть.

Все остальные глаголы относятся к первому спряжению, кроме разноспрягаемых. Да-да, есть еще и такие, но их всего два: хотеть и бежать (плюс, конечно, все приставочные производные от них: прибежать, захотеть, перехотеть и так далее).

Особенность этих глаголов в том, что в разных формах они имеют окончания и первого, и второго спряжений.

«Хотеть» в единственном числе спрягается как глагол первого типа (хочешь, хочет), а во множественном как глагол 2 спряжения (хотят, хотим).

«Бежать» в 3 лице множественного числа имеет окончание –ут (первого спряжения), в остальных случаях — окончания 2 спряжения.

И еще один секрет. Если вы определяете спряжение глагола с приставкой ВЫ, то ее нужно ВЫбросить, так как она перетягивает ударение на себя.

Например: выгорит – горит. Окончание ударное, слышим и пишем И.

Еще раз приведем алгоритм определения спряжения (важно не пропускать первый пункт!):

• Поставьте глагол в личную форму (например, в сочетании с местоимением ОН), проверьте, попадает ли окончание под ударение. Если есть приставка ВЫ – отбросьте ее. Если окончание не ударное, то переходите ко второму пункту.
• Поставьте глагол в начальную форму (отвечает на вопросы что делать / что сделать?)
• Проверьте, не входит ли он в список 11 глаголов, не является ли разноспрягаемым.

Например, вам нужно определить спряжение глагола: «покупать». Первым делом, поставьте глагол в личную форму и проверьте, не является ли окончание ударным.

Он покупАет.

Внимание! Часто вы забываете проверить окончание на ударность в личной форме глагола и сразу переходите ко второму пункту. Это в основном и приводит к ошибкам в определении спряжения.

В личной форме окончание не под ударением — поставьте глагол в начальную форму:

Что делать? – Покупать.

Глагол на –ать, но он не входит в список «гнать, держать, слышать, дышать» и не является разноспрягаемым, значит, это глагол 1 спряжения.

Итак, научиться правильно определять спряжение несложно, нужно только помнить, что на первом этапе необходимо ставить глагол в личную форму, не забывать про разноспрягаемые глаголы и коварную приставку ВЫ-.

Теперь вы знаете, как определить спряжение глаголов в русском языке.

Статья была полезной? Ставьте лайк, делитесь в соцсетях, подписывайтесь на канал.

Как определить спряжение глагола? — Памятки по русскому языку — Памятки ученикам

Спряжение – основная категория глагола как части речи. В языкознании существует два понимания термина «спряжение глаголов». Спряжением глагола в широком смысле является его изменение по числам, лицам, наклонениям и временам. Спряжение в узком смысле – изменения глагола по лицам и числам. Необходимо уметь правильно определять спряжение каждого глагола, поскольку от этого напрямую зависит уровень грамотности. Нередко нужно точно выяснить тип спряжения глагола, чтобы правильно написать слово в конкретной форме.

Если окончание глагола находится под ударением, нужно поставить глагол в форму множественно числа третьего лица. Гласные в окончании слова сигнализируют о принадлежности глагола к 1 или 2 спряжению.

Глаголы 1 спряжения имеют окончания –ут (-ют), 2 спряжения – -ат (-ят).

Например, к 1 спряжению относятся глаголы читают, поют, цветут, а ко 2 – висят, горят, лежат.

Очень важно запомнить: определить спряжение по окончанию глагола множественного числа третьего лица можно только в том случае, если на окончание падает ударение.

Если на окончание глагола ударение не падает, слово нужно перевести в неопределённую форму. Например: дышат – дышать. Начальная форма отвечает на вопрос «что делать», не имеет основных категорий. Она сохраняет только признак вида, а также по ней определяют возвратный ли глагол, переходный он или непереходный. Начальную (неопределённую) форму принято называть инфинитивом.

Глаголы, имеющие безударное окончание в начальной форме –ить, относятся ко 2 спряжению.

Остальные глаголы относятся к 1 спряжению. Также нужно запомнить ряд глаголов, являющихся исключениями из правил.

К глаголам 1 спряжения относятся следующие слова-исключения: бить, брить, вить, гнить, жить, зиждиться, зыбить, лить, пить, почить, стелить, шить, -шибить (ушибить, ошибиться), а также все глаголы, которые от них образованы.

Ещё в школе все познакомились с лёгкой считалкой, позволяющей быстро запомнить 11 глаголов, которые являются наиболее распространёнными словами-исключениями из правила. Они не оканчиваются на –ить, но тоже относятся ко 2 спряжению. В данном случае они перечислены по алфавиту: вертеть, видеть, гнать, держать, дышать, зависеть, ненавидеть, обидеть, слышать, смотреть, терпеть. Эти слова необходимо запомнить

Глаголы, имеющие ударную приставку «вы» требуют особого внимания. Для точного определения спряжения, приставку нужно отбросить. В тех случаях, когда окончания оказываются под ударением, по ним выясняют спряжение. Если окончание безударно, глагол ставят в неопределённую форму. Безусловно, приставку отбрасывают только тогда, когда слово употребляется без неё.

Существует группа разноспрягаемых глаголов смешанного типа: бежать, хотеть, чтить и все производные формы от данных слов. Они спрягаются по разным моделям, это необходимо запомнить.

Глаголы «бежать», «чтить», находящиеся в форме первого, второго лица, единственного числа нужно склонять как глаголы 2 спряжения. По модели 1 спряжения данные глаголы спрягаются в форме множественного числа, третьего лица. Возможны альтернативные формы чтут и чтят.

По модели 2 спряжения надо склонять глагол «хотеть» во множественном числе, а в единственном числе – как глагол 1 спряжения.

Архаичные окончания у глаголов «дать» и «есть».

Достаточно запомнить правила и выучить все слова-исключения, чтобы правил

Личные окончания глаголов — ВСПОМИНАЕМ, ПОВТОРЯЕМ, ИЗУЧАЕМ

Цели: развивать умение определять спряжение глаголов; показать значение этого умения для правописания; закрепить навыки правописания глаголов; развивать мотивацию к аналитической деятельности; формировать способность к рефлексии.

Планируемые результаты: учащиеся научатся определять спряжение глагола, выбирать гласную в личных окончаниях глагола; узнают алгоритм определения спряжения; приемы получения информации; научатся объяснять языковые явления.

Ход урока

I. Организационный момент

II. Актуализация знаний

Проверка домашнего задания.

Чтение и анализ сочинений.

III. Работа по теме урока

— Какие окончания глаголов называются личными? Почему?

— Какие глаголы изменяются по лицам и числам? (Глаголы настоящего и будущего времени. )

Упр. 88 — работа с таблицей личных окончаний глаголов.

— Есть ли сомнения, к какому спряжению отнести глаголы

вести, петь, говорить, молчать? Почему? (Первые два глагола I спряжения, остальные — II. Сомнений в определении спряжений нет, потому что глаголы имеют ударные личные окончания: ведём, поют, говоришь, молчат.)

— Как определить спряжение глагола, если его окончание безударное? (Определяем спряжение по начальной форме глагола.)

Спряжение — это изменение глаголов по лицам и числам. Давно заметили, что все глаголы изменяются по одному из двух типов. Одни глаголы имеют в окончаниях гласные е и у (ю) (I спряжение), другие — гласные и и а (я) (II спряжение).

Если окончания глаголов ударные, всё просто, спряжение определить легко, но это совсем необязательно делать: мы и так напишем правильно. Если же окончания глаголов безударные, мы определяем спряжение по начальной форме глагола, а уж потом решаем, какую букву писать в личном окончании.

I спряжение	II спряжение
Брить, стелить + все глаголы на —ать, —оть, —уть, —нь и т. д.	Все глаголы на —ить, кроме брить, стелить, + 11 глаголов-исключений
Окончания —ешь, -ет, -ем, -ете, -ут (-ют)	Окончания —ишь, -ит, -им, -ите, -aт (-ят)

IV. Закрепление изученного материала

1. Работа по учебнику.

1) Упр. 89 — комментированное письмо; морфемный разбор (на доске и в тетрадях).

2) Упр. 91 — устное составление предложений, запись лучших в тетради.

2. Повторение раздельного написания не с глаголами.

1) Спишите записанные на доске глаголы, вставьте, где необходимо, пропущенные буквы, отметьте орфограммы-буквы и орфограммы-пробелы.

(Не)навид..ш.. лень, (не)упуст..м возможность, они (не)смотр..т, (не)хоч..т..ся заниматься, дело (не)дела..т..ся, (не)догон..ш.. автобус, дети (не)купа..т..ся.

2) Упр. 90 — выразительное чтение, самостоятельное выполнение.

V. Подведение итогов. Рефлексия

— Что вы знаете о глаголе как части речи?

— Какие правила правописания глаголов мы повторили за несколько уроков?

— Какие правила для вас кажутся трудными?

— Какие ошибки вы еще делаете при написании глаголов?

— Что представляется вам легким и понятным в теме “Глагол”?

Домашнее задание

1. § 16—19 — повторить.

2. Упр. 92.

Моя школа 2070 — Спряжение глаголов

Спряжение — изменение глаголов в формах настоящего и будущего времени по лицам и числам.

Типы спряжений

• Первое
• Второе
• Разноспрягаемые глаголы
• Архаическое

Как определить спряжение?

ШАГ 1. Выясняем, ударное окончание или нет.

Для определения спряжения глагола с ударным личным окончанием достаточно проспрягать слово по числам и лицам. Перечень личных окончаний глаголов I и II спряжения с примерами представлен в таблице ниже.

ЗАПОМНИ!

Гласные в ударных окончаниях глагола: Е/Ё, У, Ю – I спряжение, И, А, Я – II спряжение

Лицо	Глаголы 1 спряжения			Глаголы 2 спряжения
	Ед.ч.	Мн.ч.	Примеры	Ед.ч.	Мн.ч.	Примеры
1-е	—у́(ю́)	—е́м(ё́м)	пою́, сошью́, расту́ поё́м, сошьё́м , растё́м	—у́(ю́)	—и́м	лечу́, спешу́, молчу́ лети́м, спеши́м, молчи́м
2-е	—е́шь(ё́шь)	—е́те(ё́те)	поё́шь, сошьё́шь, растё́шь поё́те, сошьё́те, растё́те	—и́шь	—и́те	лети́шь, спеши́шь, молчи́шь лети́те, спеши́те, молчи́те
3-е	—е́т(ё́т)	—у́т(ю́т)	поё́т, сошьё́т, растё́т пою́т, сошью́т, раст у́т	—и́т	—а́т(я́т)	лети́т, спеши́т, молчи́т летя́т, спеша́т, молча́т

ЗАПОМНИ!

В первом лице единственного числа (я что делаю?) окончания —у, —ю совпадают для первого и второго спряжений, поэтому для определения спряжения используйте второе, третье лицо или множественное число.

Например:

Зададим к глаголу вопрос 2 лица единственного числа:

ТЫ ЧТО ДЕЛАЕШЬ? Для глаголов несовершенного вида.
  ПЕЧЁШЬ, ИДЁШЬ, ПОЁШЬ = I СПРЯЖЕНИЕ.
  СИДИШЬ, ЛЕТИШЬ, СПЕШИШЬ = II СПРЯЖЕНИЕ.

ТЫ ЧТО СДЕЛАЕШЬ? Для глаголов совершенного вида.
 
 
  ЗАПЕЧЁШЬ = I СПРЯЖЕНИЕ.
  ПОСИДИШЬ = II СПРЯЖЕНИЕ.

ИТОГ: спряжение сразу определили по соответствующей гласной.

ЗАПОМНИ!

Глаголы с ударным личным окончанием нельзя ставить в инфинитив для определения спряжения.

Например:

Задание: определить спряжение глагола СИДЕТЬ.

Ошибочное рассуждение: Это начальная форма. Окончание –ть. Мы видим букву е перед –ть. Следовательно, ученик отвечает: I спряжение. Но это будет первой ошибкой. Ученик не знает, что нужно проверять, ударное окончание или нет. А когда указываешь на необходимость поставить ударение, ученик проверяет ударение по инфинитиву, а не по одной из форм (2-е и 3-е лицо ед. и мн.ч. и 1-е лицо мн.ч.), что является второй ошибкой.

Итак, сначала надо проверить, ударное ли окончание у этого глагола при спряжении, то есть при изменении по лицам и числам.

Верное рассуждение: Ты что делаешь? СИДИ́ШЬ. Окончание ударное. Сильная позиция гласной. В окончании буква И. Это II спряжение.

Настоящее время
Лицо	ед.ч.	мн.ч.
1-е	сижу́	сиди́м
2-е	сиди́шь	сиди́те
3-е	сиди́т	сидя́т

Итак, в этом случае для определения спряжения к форме инфинитива НЕ обращаемся.
В окончаниях глагола УЖЕ видим буквы И, А, Я. Они указывают на то, что это гласные в окончаниях глаголов второго спряжения, а не первого.

СИДЕТЬ

– несовершенный вид, непереходный, невозвратный, II спряжение.

ШАГ 2. Если окончание безударное.

Например:

ТЫ ЧТО ДЕЛАЕШЬ? Рису́ешь, чита́ешь, успева́ешь, кра́сишь, ма́жешь
ТЫ ЧТО СДЕЛАЕШЬ? Напи́шешь, посе́ешь, вы́кинешь, нау́чишься.

Спряжение глаголов с безударными личными окончаниями находят по неопределённой форме этих глаголов, то есть по инфинитиву. Вспоминаем, что это начальная форма глаголов, которая так нам нужна при морфологических разборах под цифрой 3 в учебниках.

СПРАВКА

Вопросы к глаголам в начальной форме:
  Что делать? Для глаголов несовершенного вида.
  Что сделать? Для глаголов совершенного вида.

Глаголы в неопределённой форме имеют окончания –ТЬ и –ТИ: спрашивать – спросить; приносить – принести.
Неопределённая форма глагола (или инфинитив, от лат. infinitivus — «неопределённый») обозначает действие безотносительно к наклонению, времени, лицу, числу, то есть вне связи его с субъектом (деятелем).

Инфинитив является начальной (словарной) формой глагола и отвечает на вопросы что делать? что сделать?:
  видеть — увидеть, сеять — посеять, смотреть — рассмотреть,
  везти — провезти, идти — пройти, искать — найти.
Инфинитив — неизменяемая форма глагола, которая имеет только постоянные морфологические признаки глагола: вид, переходность/непереходность, возвратность/невозвратность, тип спряжения.
Итог: Формальным показателем инфинитива являются окончания (суффиксы в некоторых методиках) –ТЬ, –ТИ.
  –ТЬ стоит после гласных: следить, думать, петь.
  –ТИ стоит после согласных: нести, везти, плести, ид ти.

Некоторые глаголы в инфинитиве оканчиваются на –ЧЬ: печь, беречь, течь, мочь. В этих случаях –ЧЬ входит в состав корня, так как является результатом исторического слияния суффикса ТИ с корневой согласной К или Г: пекти → печь, берегти → беречь.

Глаголы, которые оканчиваются в неопределённой форме на –ИТЬ, причём –ТЬ – это окончание, а —И— – суффикс, относятся ко II спряжению: по́мнить, стро́ить, е́здить, ста́вить, ходи́ть.

Остальные глаголы, кроме нескольких слов-исключений, относятся к I спряжению. В неопределённой (начальной) форме они обычно оканчиваются на —ать, —ять, —еть, —уть, —оть, —ыть: де́лать, се́ять, черне́ть, кри́кнуть, коло́ть, ры́ть, дви́гаться, привыка́ть, печа́тать, стира́ть, кача́ть.

Ко второму же спряжению
Отнесем мы без сомненья
Все глаголы, что на -ить,
Исключая брить, стелить,
А ещё: смотреть, обидеть,
слышать, видеть, ненавидеть,
гнать, дышать,
       держать, терпеть,
и зависеть, и вертеть.

I спряжение	II спряжение
4 глагола на —ИТЬ (бри́ть, стели́ть, зы́биться, зи́ждиться)	Все глагола на —ИТЬ (кроме 4-х)
Все глагола на —ЕТЬ (кроме 7-и)	7 глагола на —ЕТЬ (терпе́ть, верте́ть, оби́деть, ненави́деть, зави́сеть, смотре́ть, ви́деть)
Все глагола на —АТЬ (кроме 4-х)	4 глагола на —АТЬ (гна́ть, держа́ть, слы́шать, дыша́ть)
Все глагола на —УТЬ, —ЮТЬ, —ЫТЬ, —ЯТЬ, —ЧЬ. ..

ПРОВЕРЬ СЕБЯ

Образовано от: хотеть, бежать? Да Разноспрягаемый глагол Нет Образовано от: есть, дать, надоесть, создать? Да Архаическое спряжение Нет Определи форму 2-го лица ед.числа:
что (c)делаешь? Да Окончание ударное? Да Какая гласная в окончании?
Да: Е,У,Ю. Нет: И,А,Я. Да I спряжение Нет II спряжение Нет Определи инфинитив:

что (c)делать? Да Оканчивается на -ИТЬ? Да Образовано от: брить, стелить, зыбиться, зиждиться Да I спряжение Нет II спряжение Нет Оканчивается на -ЕТЬ? Да Образ.от: терпеть, вертеть, обидеть, ненавидеть, зависеть, смотреть, видеть? Да II спряжение Нет I спряжение Нет Оканчивается на -АТЬ? Да Образовано от: гнать, держать, слышать, дышать? Да II спряжение Нет I спряжение Нет I спряжение

Разбор слова

ОБИДЕТЬ – II спряжение

Лицо	Будущее время
	ед. ч.	мн.ч.
1-е	оби́жу	оби́дим
2-е	оби́дишь	оби́дите
3-е	оби́дит	оби́дят

Разбор слова

БОРМОТАТЬ – I спряжение

Лицо	Настоящее время		Будущее время
	ед.ч.	мн.ч.	ед.ч.	мн.ч.
1-е	бормочу́	бормо́чем	забормочу́	забормо́чем
2-е	бормо́чешь	бормо́чете	забормо́чешь	забормо́чете
3-е	бормо́чет	бормо́чут	забормо́чет	забормо́чут

ЗАПОМНИ!

В форме 2 лица ед. числа глаголы настоящего и будущего времени оканчиваются на шипящий Ш и Ь. Это орфограмма.

    Наст. вр., 2 л., ед.ч.: ты думаешь, пишешь, плаваешь, учишь, смотришь.
    Буд. вр., 2 л., ед.ч.: ты будешь писать, будешь учить, найдёшь, выучишь.

Внимание! После шипящих на конце глагола всегда пишется мягкий знак, который сохраняется перед —ся, —те:
    Одеваешь – одеваешься, стричь – стричься, режь – режьте.
    Что делаешь? (2л., ед.ч.) Бежишь, делаешь, побежишь, сделаешь.
    Что делать? (неопределённая форма) Стричь, беречь.
    Что сделай? (повелит. накл. глагола) Отрежь, намажь, спрячь.

Например:

Задание: Проспрягай в тетради глаголы: побри́ть, поддержа́ть, зави́сеть, ры́ть, возвели́чивать, моло́ть, моли́ться.

Образец рассуждение: Побри́ть – I спр., так как БРИТЬ – глагол-исключение, в окончаниях будут гласные е, у, ю.

Лицо	ед.ч.	мн.ч.
1-е	я побре́ю	мы побре́ем
2-е	ты побре́ешь	вы побре́ете
3-е	он(она, оно) побре́ет	они побре́ют

Если глагол I спряжения: гласные Е, У, Ю пиши в окончаниях.
Если глагол II спряжения: гласные И, А, Я пиши в окончаниях.

 

Разноспрягаемые глаголы

Глаголы хотеть, бежать и образованные от них являются разноспрягаемыми, потому что имеют окончания разных спряжений:

Число	Лицо	Хотеть	Бежать
Ед.ч.	1 2 3	хочу́ хо́чешь хо́чет	бегу́ бежи́шь бежи́т
Мн.ч.	1 2 3	хоти́м хоти́те хотя́т	бежи́м бежи́те бегу́т

Архаический тип спряжения

Глаголы есть, надоесть, дать, создать и образованные от них при помощи приставки и постфикса имеют особые формы, являющиеся архаическими

Число	Лицо	Есть	Дать	Создать	Надоесть
Ед. ч.	1 2 3	е́м е́шь е́ст	да́м да́шь да́ст	созда́м созда́шь созда́ст	надое́м надое́шь надое́ст
Мн.ч.	1 2 3	еди́м еди́те едя́т	дади́м дади́те даду́т	создади́м создади́те создаду́т	надоеди́м надоеди́те надоедя́т

Глаголы-исключения

ЗАПОМНИ!

Выучи исключения:
    I спряжение на —ИТЬ – брить, стелить, зыбиться, зиждиться
    II спряжение на —ЕТЬ – смотреть, видеть, обидеть, ненавидеть, зависеть, терпеть, вертеть
    II спряжение на —АТЬ – слышать, дышать, держать, гнать
    Разноспрягаемые – хотеть, бежать
    Архаические – есть, дать, надоесть, создать

Как определить спряжение слова быть

Глагол

  Слово «быть» отвечает на вопрос «что делать?». Из этого мы можем сделать вывод, что это слово является глаголом, но что же такое глагол по определению? Если вдруг ваш учитель задаст вам такой вопрос, то вы сможете на него ответить.

Глагол — такая самостоятельная часть речи, которая представляет собой действие и отвечает на вопросы «что делать?», «что сделать» и другие вопросы, характеризующие действие и состояние предмета. Примеры глаголов: стоять, двигаться, мчать, гнать, говорить. 

 У глагола можно определить множество морфологический признаков по типу времени, переходность, но нас интересует сейчас именно спряжение. 

Спряжение глаголов

 Спряжение глаголов — это их умение изменяться по числам и лицам. Оно создано для того, чтобы определять, какую букву нужно писать в окончании, когда есть сомнения в правильности написания. 

 Итак, разберем первое спряжение. К этому спряжению относятся глаголы, начальная форма которых оканчивается на:

• ет (ёт).
• ешь (ёшь).
• ете (ёте).
• ем (ём).
• ыть (ть).
• ут (ют).

 С первым спряжением мы разобрались. Ко второму спряжению относят глаголы, инфинитив которых оканчивается на:

• им.
• ит.
• ишь.
• ат (ят).
• ите.

 Но, как это принято в русском языке, на каждое правильно есть свое исключение. Это правило так же имеет исключения:

 К первому спряжению относятся брить и стелить, не смотря на то, что то, что они не подходят по правилу. Но так решил великий и могучий русский язык, поэтому надо просто запомнить.

 Ко второму спряжению относятся: гнать, терпеть, держать, смотреть, видеть, дышать, ненавидеть, зависеть,обидеть, вертеть, слышать. Это тоже просто надо запомнить. Тем более, слова созвучные, запоминаются они достаточно легко и просто.

 Учителя часто любят как дополнительный вопрос задать такой: «Какие глаголы являются исключением из спряжения?». Поэтому запомнить надо обязательно!

Определение спряжения глагола «быть»

 Теперь мы выяснили, какие глаголы относятся к какому спряжение и, вооружившись нашими знаниями, теперь можем определить спряжение глагола «быть», данного нам в задании.

 Итак, глагол «быть» уже стоит в начальной форме и  оканчивается на «ыть», а, следуя правилу, глагол, оканчивающиеся на «ыть» — это глагол 1-го спряжение.

 Ответ: слово «быть» относится к 1 спряжению.

 

Личные окончания глаголов настоящего и будущего времени — Правило

Упражнения к правилу

Глаголы в настоящем и будущем времени изменяются по лицам и числам (это называется спряжением).

По своим личным окончаниям глаголы делятся на два типа:
I спряжения: -у (-ю), -ешь, -ет, -ем, -ете, -ут (-ют)
II спряжения: -у (-ю), -ишь, -ит, -им, -ите, -ат (-ят)

Пример 1. Проспрягаем глагол I спряжения «гулять».

1 лицо → я гуляю, мы гуляем
2 лицо → ты гуляешь, вы гуляете
3 лицо → он гуляет, они гуляют

Пример 2. Проспрягаем глагол II спряжения «возить».

1 лицо → я вожу, мы возим
2 лицо → ты возишь, вы возите
3 лицо → он возит, они возят

Определение спряжения глаголов

Ко II спряжению относятся глаголы, которые в начальной форме оканчиваются на -ить
(пилить, носить, дежурить)
и глаголы-исключения: гнать, держать, дышать, слышать, смотреть, видеть, ненавидеть, обидеть, вертеть, зависеть, терпеть.

К I спряжению относятся все остальные глаголы:
на -еть, -ать, -ять, -оть, -уть, -ыть, -ти, -чь
(писать, сеять, прыгнуть)
и глаголы-исключения: брить, стелить, зиждиться.

Примечание.
Глаголы-исключения с приставками также являются исключениями:
пригнать, задержать, надышаться, услышать, подсмотреть, свидеться, разобидеться, повертеть, перетерпеть, расстелить и другие.

Применение правила

Чтобы определить, какую гласную писать в безударном окончании, нужно:

Шаг 1. Поставить глагол в неопределенную форму.
он кол..т → колоть
ты леч..шь → лечить

Шаг 2. Определить, какая гласная стоит перед -ть.

Шаг 3. Решить, к какому спряжению относится глагол и какое личное окончание должно быть написано.
колоть → -оть → I спр → колет
лечить → -ить → II спр → лечишь

Примечание.
Под ударением пишется то, что слышится:
гляди́т, сиди́т, молчи́т, спи́т, кричи́т.

Примеры

Он тащ..т → н.ф. – тащить → на -ить → II спряжение → он тащит

Ты скач..шь → н.ф. – скакать → на -ать → I спр → ты скачешь

Мы догон..м → н.ф. – догнать → на -ать → II спр, исключение → мы догоним

Конспект урока на тему» Продолжаем определять спряжение глагола»

Конспект урока по русскому языку 4 класс

УМК « Перспективная начальная школа, авторы учебника : М,Л, Каленчук, Н. А,Чуракова, Т,А,Байкова

Тема: « Продолжаем определять спряжение глагола»

Цели:

1. Продолжить работу по определению спряжения по начальной форме глагола;

2. Познакомить с глаголами -исключениями , имеющими глагольный суффикс Е;

3. Работать над запоминанием глаголов-исключений

4.Создать условия для формирования личностных качеств:

Задачи:

познакомить с глаголами-исключениями, оканчивающимися на еть;

закреплять умение определять спряжение глагола по его начальной форме

формировать

познавательные УУД применять правила, пользоваться словарями, делать выводы, использовать алгоритмы

Регулятивные УУД определять цели, задачи урока, понимать смысл инструкции учителя и заданий.

Коммуникативные УУД сотрудничество в работе пары, группы, умение договариваться.

Личностные: заинтересованность в приобретении и расширении знаний и способов действий

Основная деятельность на уроке:

Учебно-поисковая

Оборудование: учебники, рабочая тетрадь на печатной основе, тетрадь- справочник.

Ход урока

1. Организационный момент

Начинается урок,

Он пойдёт ребятам впрок.

Постарайтесь всё понять,

Учитесь тайны открывать,

Ответы полные давать.

Чтоб за работу получать,

Только лишь отметку пять!

Запишем число, классная работа.

2.Актуализация знаний

Ребята, откройте учебники на странице 74. Сегодня один из уроков большой темы. Что это за тема?

Слово продолжаем подсказывает нам, что определять спряжение глаголов по начальной форме нам уже приходилось.

Как определить спряжение глагола в начальной форме?

3.Открытие нового знания

Открой обратный словарь, на еть. Найди глаголы, напечатанные крупным шрифтом. Выпиши столбиком те из них, которые не выделены жирным шрифтом. Их должно быть 7.

К какому спряжению должны относиться эти глаголы согласно правилу?

А теперь посмотрите, как спрягаются эти глаголы

Какого спряжения эти глаголы, если судить по их личным окончаниям?

Это глаголы -исключения

Запишем эти глаголы в форме 2 лица единственного числа и множественного числа. Букву и в окончании подчеркните.

Комментируем.

Обратите внимание на картинку в учебнике, она поможет запомнить глаголы-исключения.

Что же узнали нового о глаголах?

4. Первичное закрепление

Работа в группах

Запомним глаголы-исключения и решим кроссворд (см. приложение 1)

Подберите и запишите ответы, используя глаголы исключения. Работаем в группах

Для чего надо знать к какому спряжению относится глагол?

Вспомним алгоритм

1. Ставим в глаголе ударение:

окончание ударное или нет?

2.Является ли глаголом исключением

3.Определяем спряжение по начальной форме

4. Пишем окончание глагола в соответствии со спряжением

Правильно писать личные окончания глаголов нам понадобится в упражнении № 40 в тетради тпо

Работаем в парах. Позовите друга взглядом.

6. Выделение глаголов -исключений на слух из текста

Я зачитаю вам отрывки из литературных произведений.

Найдите в каждом глагол исключение и запишите, поставив его в форму 3 лица множественного числа

К морю лишь подходит он,

Вот и слышит будто стон.

Смотри — видит, дело лихо:

Бьётся лебедь средь зыбей

Их он кормит и поит,

И ответ держать велит

А царица хохотать

И плечами пожимать,

И подмигивать глазами,

И прищёлкивать перстами,

И вертеться подбочась,

Гордо в зеркало глядясь.

7.Рефлексия

А теперь настало время подвести итог урока:

продолжи предложение.

-сегодня я узнал…

-меня удивило…

-было трудно..

Конъюгация и резонанс в органической химии

Конъюгация в органической химии: определение, примеры, исследования и последствия

Это первая из серии статей, которые в конечном итоге будут посвящены конъюгации, пи-системам, теории молекулярных орбит, диенам и диенам. 1,2- и 1,4-присоединения, реакция Дильса-Альдера и другие перициклические реакции. Мы начнем с обзора основ!

Содержание

1. Пересмотр связи Pi (и связи Pi): «Боковое» перекрытие орбиталей между соседними p-орбиталями
2. Важность перекрытия орбит для связывания Pi
3. Помимо связей Pi: «Сопряжение ”Из 3-х или более p-орбиталей
4. Различие между конъюгацией и резонансом
5. Последствия конъюгации (1): Длина связи
6. Когда формы резонанса не идентичны, резонансный гибрид будет« взвешенным »гибридом наиболее важного резонанса Формы
7. Последствия конъюгации (2): «Частичные» двойные связи
8. Последствия конъюгации (3): Реактивность сопряженной системы часто обнаруживается ее «второй лучшей» резонансной формой
9. Орбитальное перекрытие (Все p- Орбитали в одной плоскости) требуется для сопряжения (и резонанса)
10. Плацдарм Амиды не сопряжены и гораздо легче разрушаются, чем «обычные» амиды
11. More Conseque Принципы конъюгации: цвет и циклоприсоединения
12. Далее: теория молекулярных орбиталей
13. Примечания

---

1. Возвращаясь к связи Pi (и связи Pi): «Боковое» перекрытие орбиталей между соседними p-орбиталями

Одна из первых вещей, которые вы узнаете об алкенах, это то, что вращения на вокруг связи CC-пи (π) не происходит . Например, при нормальных температурах и давлениях никогда не наблюдается спонтанного превращения транс -2-бутена (показан внизу слева) в цис -2-бутен (справа). Это разделяемые соединения с разными температурами плавления и кипения. Вы можете купить каждый из них отдельно у Aldrich.Это было бы невозможно, если бы двойная связь вращалась свободно.

Углубившись в это, мы увидели, что это происходит из-за явления, называемого «пи-связью» — бокового перекрытия двух соседних p-орбиталей , каждая из которых содержит электрон, что приводит к предпочтительной ориентации. где p-орбитали «выстраиваются» рядом друг с другом, как солдаты. Из-за гантелеподобной геометрии p-орбитали перекрытие невозможно, когда две p-орбитали расположены под углом 90 ° друг к другу, что и составляет этот «барьер вращения».

[Заштрихованные (синие) и незатененные (белые) доли каждой p-орбитали представляют свойство, называемое «фазой», которое является свойством p-орбиталей — я бы посоветовал вернуться к этой теме, если это заставляет вас тошнотворно, потому что мы будем часто использовать его в следующих публикациях. Как и в случае волн, существует конструктивная интерференция между лепестками «одинаковой» фазы и деструктивная интерференция между лепестками «непохожей» фазы]

Это имеет и другие физические последствия помимо барьера вращения: это также влияет на геометрию молекулы .Поскольку Pi-связывание является явлением исключительно для p-орбиталей, это означает, что каждая пи-связь, в которой участвует атом, оставляет на одну p-орбиталь меньше доступной для «гибридизации» с s-орбиталью [и оставшейся p-орбиталью (ами)] на атом. Это приводит к знакомой «тригональной планарной» (sp ² ) геометрии для типичных алкеновых углеродов и «линейной» геометрии (sp) для алкиновых углеродов.

Следовательно, алкены являются «плоскими», в отличие от алкильных углеродов, которые имеют тетраэдрическую геометрию.

2.Важность орбитального перекрытия для связывания Pi

Яркую иллюстрацию важности орбитального перекрытия дает случай, когда мы могли бы наивно подумать, что двойная связь «должна» образоваться — , но этого не происходит. В 1924 году Бредт заметил, что алкены не имеют тенденции образовываться на позициях «плацдарма», например, в молекуле внизу слева, это наблюдение было названо «правилом Бредта».

Почему нет? Если вы создадите модель, вы увидите, что геометрия бициклического кольца заставляет эти p-орбитали ориентироваться под прямым углом. Нет перекрытия между p-орбиталями . Следовательно, он больше похож на углерод с двумя соседними радикалами, чем на настоящую пи-связь!

Трехмерные рисунки на плоской поверхности не в полной мере отражают славу трехмерной структуры. Вот модель и сопроводительное видео. [RIP Vine, который отлично подходит для коротких видеороликов об органической химии]

Те розовые штуки, как предполагается, являются p-орбиталями. Видите, как они расположены под прямым углом друг к другу? Это означает, что они не пересекаются.

via GIPHY

Суть в том, что вам нужно перекрытие между p-орбиталями, чтобы образовалась связь Pi. В ациклических системах это, как правило, не проблема [см. Сноску для заметного исключения]

3. Связи за пределами Pi: «Конъюгация» 3 или более p-орбиталей

В первом семестре по органической химии мы узнаем, что это перекрытие p-орбиталей является не обязательно ограничиваться двумя соседними p-орбиталями. Перекрытие может выходить за пределы двух p-орбиталей и включать трех, четырех, пяти и даже более последовательных p-орбиталей на последовательных атомах , создавая более крупные «пи-системы» (например, ликопин ).

Мы также видим, что определение «p-орбитали» является в некоторой степени гибким и может включать такие примеры, как

• пустая p-орбиталь (например, в карбокатионе или пустая p-орбиталь на боре)
• орбиталь, содержащая неподеленная пара (например, на азоте, кислороде, фторе и т. д.)
• p-орбитали пи-связи [например, другой алкен, C = O (карбонил) и т. д.]
• наполовину заполненная орбиталь (например, радикальный)

Мы называем это «наращиванием» p-орбиталей в более крупные «пи-системы», «конъюгацией ». В каждой из средних молекул, представленных ниже, алкен (пи-связь) сопряжен с соседней р-орбиталью.

«Убийца конъюгации», на который следует обратить внимание, — это атом, у которого отсутствуют неподеленные пары, связанные только с одинарными связями, например, CH ₂ в примере внизу справа (1,4-пентадиен). Эти две пи-связи конъюгированы не , а .

[Примечание ко второму примеру. Мы обычно думаем о геометрии азота с тремя одинарными связями как о тригонально-пирамидальной (например.грамм. как в NH ₃ ). Но в присутствии соседней пи-связи происходит небольшая «повторная гибридизация» азота от sp ³ до sp ² (тригонально-планарная), так что неподеленная пара находится на ап-орбитали, а не sp ^{. 3} орбитальный. Это компромисс: слегка увеличенная деформация затмеваемых связей N-H компенсируется уменьшением общей энергии из-за лучшего перекрытия p-орбитали с пи-связью. Обычно мы думаем об этом как о «резонансной энергии».]

Вот забавный вопрос с подвохом. Конъюгированы ли двойные связи в молекуле ниже ( аллен )? Почему или почему нет? [ответ в сносках]

4. Различие между конъюгацией и резонансом

Вы можете спросить: это просто звучит как резонанс. Какая разница?

Давайте на секунду выделим сопряжение и резонанс .

• Конъюгация — это то, что мы называем, когда 3 или более p-орбиталей объединяются вместе в большую «пи-систему».
• Эти сопряженные пи-системы содержат электроны, которые мы часто называем «пи-электронами», чтобы отличить их от электронов, составляющих одинарные связи в молекуле.
• Различное расположение электронов внутри этой «пи-системы» называется резонансными формами .

Грубая аналогия могла бы выглядеть так:

• Думайте о p-орбиталях как о «комнатах» для электронов (максимальная вместимость: 2)
• Объединение нескольких комнат в большое здание — это спряжение
• допустимые размещений людей (электронов) внутри этого здания — это резонансных форм.

Ключевым требованием для сопряжения является перекрытие орбит , которое мы немного расширим.

А пока давайте рассмотрим некоторые последствия спряжения.

5. Последствия конъюгации (1): длины связи

Как я только что сказал, мы больше привыкли к спряжению в контексте «резонанса», концепции, которую мы рассмотрели ранее (и поскольку эта серия При переходе на территорию второго семестра стоит заново ознакомиться)

Например, с ацетат-ионом (CH ₃ CO ₂ ) ^— и аллильным катионом (оба показаны ниже), мы увидели, что Есть два разных способа расположения пи-электронов, которые мы называем «резонансными формами».

Важно отметить, что пи-электроны в них не постоянно переключаются между атомами; скорее, «истинная» структура молекулы является гибридом этих резонансных форм.

Одним из важных следствий резонанса является длин связей, которые занимают промежуточное положение между двумя формами.

Например, длина связи C-O в ацетат-ионе (1,26 Å) составляет между тем, что мы ожидаем для пи-связи C-O (1. 20 Å) и одинарной связи C-O (1,4 Å).

6. Когда резонансные формы не идентичны, резонансный гибрид будет «взвешенным» гибридом наиболее важных резонансных форм

В ацетат-ионе и аллильном катионе две важные резонансные формы равны , эквивалент , так что оба в конечном итоге вносят одинаковый вклад в гибрид.

Чаще всего встречаются молекулы, подобные приведенным ниже, где смешиваются неравные резонансные формы. Некоторые формы резонанса важнее других. [чтобы вернуться к определению того, как оценивать формы резонанса, перейдите к этой серии сообщений. или эти видео].

Наш визуальный язык химии с его четким различием между одинарными и двойными связями неточно отображает электронную плотность в молекулах, которые представляют собой взвешенных гибридных резонансных форм. Незначительные вкладчики резонанса влияют на длину связей в молекуле, делая их короче или длиннее, чем обычно.

В верхней молекуле (бутадиен) эта центральная связь C-C немного на короче , чем «нормальная» одинарная связь C-C (т.е.е. он имеет немного характер двойной связи) из-за влияния незначительного резонансного фактора гибрида. [Обратите внимание, что длина связи не находится посередине между одинарной и двойной связью CC, как это было в аллильном катионе: это потому, что две резонансные формы не одинаково важны (т.е. не вносят одинаковый вклад в резонансный гибрид)]

В нижней молекуле («ацетамид») связь CO немного на длиннее , чем «нормальная» связь C = O (т.е. имеет более одинарный характер), а связь CN немного на короче , чем «обычная» облигация CN (т.е.е. имеет более характер двойной связи). Это отражает влияние «второстепенного вкладчика» (или «второго лучшего» вкладчика, если хотите), в котором есть пи-облигация C-N и одинарная облигация C-O.

Сделаем наш первый концептуальный скачок.

7. Последствия спряжения (2): «частичные» двойные связи

Есть интересное последствие этого «частичного характера двойной связи» в связи C-N. У него есть «барьер для вращения», как и следовало ожидать от «двойной связи»! Барьер вращения в связи C-N амидов составляет около 15-20 ккал / моль в пептидных связях (по сравнению с примерно 2-3 ккал / моль для большинства связей C-C).

Это означает, что две конформации , , , все еще могут взаимно преобразовываться, но они делают это относительно медленно при комнатной температуре. В молекуле ниже ( N -метилацетамид) можно наблюдать конформер s -cis (обе зеленые метильные группы на одной стороне связи CN) и конформер s-trans (зеленый метил группы на противоположных сторонах связи CN) отдельно. [примечание] Обычно это невозможно для конформеров, если вы не понизите температуру до 100 Кельвинов или около того!

Для изображения выше ключевой концепцией здесь является просто символ частичной двойной связи.Если s -cis и s -trans не имеют для вас смысла после некоторого размышления, ничего страшного. Не критично для остальной части обсуждения.

8. Последствия конъюгации (3): реактивность сопряженной системы часто выявляется ее «второй лучшей» формой резонанса

Мы показали влияние конъюгации (и, в более широком смысле, резонанса) на длины облигаций.

Давайте подробнее рассмотрим его влияние на электронную плотность , которая в конечном итоге влияет на реактивность .

Для наглядности продолжим рассмотрение алкенов.

Реакционная способность алкена может быть резко изменена за счет присоединения различных групп.

Посмотрите на «вторую лучшую» форму резонанса, когда мы присоединим пи-донор , такой как N (CH ₃ ) ₂ , к алкену. Это приводит к накоплению отрицательного заряда (δ ^—) на концевом углероде алкена, в результате чего этот алкен (который мы называем енамином ) является отличным нуклеофилом. Возьмем лишь один яркий пример: енамины реагируют с алкилгалогенидами (такими как CH ₃ I) и другими электрофилами в классе реакций, иногда называемых реакциями Stork Enamine в честь их первооткрывателя, Гилберта Сторка. Обычные алкены, такие как 2-бутен (см. Ниже), не работают в этой реакции.

Присоединение пи-акцептора , такого как C = O, приводит к накоплению положительного заряда (δ ⁺ ) на концевом атоме углерода алкена, в результате чего этот вид (который мы называем α , β-ненасыщенный альдегид, акцептор Михаэля или енон) является отличным электрофилом.α, β ненасыщенные карбонилы реагируют с нуклеофилами (такими как CH ₃ S ^—) и многими другими классами нуклеофилов в реакции общего типа, которую мы называем сопряженными присоединениями или иногда реакциями Михаэля.

Это только верхушка айсберга того, как конъюгация может влиять на реактивность, но на сегодня этого достаточно.

9. Для конъюгации (и резонанса) требуется перекрытие орбиталей (все p-орбитали в одной плоскости)

До сих пор мы видели, что:

• перекрытие между p-орбиталями необходимо для образования пи-связей
• некоторые «Одинарные связи» могут иметь «характер пи-связи» из-за вклада малой резонансной формы (например, амидов)

Вот логическое следствие этих двух утверждений:

• Для того, чтобы существовала конъюгация , и поэтому для возникновения резонанса все p-орбитали должны перекрываться.Поэтому все они должны быть выровнены в одной плоскости.

Помните «катион аллила», который «стабилизируется резонансом»? Для того, чтобы карбокатион получил эту «резонансную стабилизацию», пустая p-орбиталь на карбокатионе должна быть выровнена с соседней пи-связью.

Если p-орбиталь находится под углом 90 градусов от p-орбиталей в пи-связи, сопряжения нет и, следовательно, нет стабилизации резонанса.

Как мы можем предсказать, существует барьер для вращения в аллильном катионе, так же как есть барьер для вращения в алкене.Барьер вращения в аллильном катионе составляет около 37 ккал / моль — немногим больше половины прочности пи-связи C-C.

Мы также видели, что связь C-N в амидах имеет характер частичной двойной связи с барьером для вращения около 15-20 ккал / моль.

Аналогично, этот характер «частичной двойной связи» возможен только в том случае, если p-орбиталь, содержащая неподеленную пару, способна перекрываться с p-орбиталями, составляющими связь C = O pi.

Характер частичной двойной связи связи CN в амидах долгое время считался основной причиной того, что они намного более устойчивы к разрушению, чем, скажем, сложные эфиры. [для дополнительной обработки см. Сноску ] .Поскольку белки в нашем организме соединены пептидными (амидными) связями, это немаловажное значение! Жизненные формы, основанные на сложноэфирных, а не амидных связях, были бы намного более хрупкими!

10. Амиды-плацдармы не сопряжены и гораздо легче разрушаются, чем «обычные» амиды

Амиды-плацдармы иллюстрируют, что происходит с амидами, когда перекрытие невозможно.

Так же, как мы видели в алкенах на плацдарме, в амидах на плацдарме перекрытие орбиты неподеленной пары азота и карбонильного углерода невозможно из-за скручивания.В результате связь C-N НЕ имеет характера частичной двойной связи, и ее намного легче разорвать, чем «нормальный» амид.

Амид-плацдарм, представленный ниже, — это «хинуклидон», скрученный амид, который на протяжении десятилетий ускользал от синтеза. И только в 2006 году он был наконец получен (в виде конъюгированной кислоты) умным путем в лаборатории Брайана Штольца в Калифорнийском технологическом институте.

Рентгеновская кристаллическая структура свидетельствует об отсутствии сопряжения в этом амиде. Длина связи C-N равна 1.52 Å (типично для одинарной связи C-N), а длина связи C = O составляет 1,19 Å, что типично для длины связи в альдегиде или кетоне (1,20 Å). Поэтому можно ожидать, что он немного более нестабилен по отношению к нуклеофильной атаке, чем нормальный амид, что было подтверждено в исследовании лаборатории Штольца.

11. Дополнительные последствия конъюгации: цвет и циклоприсоединения

До сих пор этот пост был в значительной степени обзором концепций первого семестра. В приведенном выше обсуждении нет ничего, что нельзя было бы разумно объяснить тем, что мы уже узнали о сопряжении и резонансе.

Однако этот упрощенный подход может только завести нас.

Два быстрых примера, потому что этот пост длился достаточно долго.

Первое: конъюгация и цвет

Если вы видели этот пост о том, как работает отбеливатель, вы узнали, что по мере увеличения длины конъюгации мы меняем длину волны, на которой молекулы поглощают свет. Некоторые очень ярко окрашенные молекулы, такие как каротин, хлорофилл и ликопин, имеют очень длинные сопряженные двойные связи.

Например, ликопин отвечает за красный цвет помидоров.Если мы удалим двойные связи, мы удалим цвет. Почему?

Какая связь между цветом и спряжением? Почему на это повлияло количество двойных связей? Резонанс не освещает этот предмет.

Секунда: реакции диенов, образующих кольца

Вот вам несколько странных реакций.

Если вы обрабатываете бутадиен молекулой справа от него (метилмалеат), вы получаете новый продукт, содержащий шестичленное кольцо.Ничего из того, что мы видели до сих пор, не готовит нас к такому типу реакции, который называется циклоприсоединением.

Интересно, что если вы обработаете этен той же молекулой, ничего не произойдет (кроме случаев, когда вы обработаете его ультрафиолетовым светом. Тогда вы получите 4-членное кольцо, но я отвлекся).

ПОЧЕМУ?

Резонанс здесь тоже не помогает.

12. Далее: теория молекулярных орбиталей

То, что поможет нам ответить на эти вопросы, а также многие другие в будущем, — это концепция, называемая теорией молекулярных орбиталей .

В следующих статьях этой серии мы собираемся более подробно изучить, как p-орбитали перекрываются, образуя молекулярных орбиталей , и исследуем энергетические уровни этих орбиталей. Мы также увидим, как это влияет на реакционную способность молекул и позволяет нам делать прогнозы об их химическом поведении.

Как мы увидим, теория молекулярных орбиталей предоставляет нам очень мощный набор концепций, которые помогут нам понять химическую реактивность на гораздо более глубоком уровне.

Спасибо Tom Struble за его помощь в написании этой статьи.

---

Примечания

Штамм A-1,2 является причиной того, что тетра-трет-бутилэтилен до сих пор не синтезирован.

Пи-связи не конъюгированы с . Посмотрите на орбитали, составляющие две пи-связи. Они расположены под прямым углом друг к другу и не могут перекрываться.

[Примечание: недавняя работа предполагает, что резонанс не так важен для ограничения амидной связи, как считалось ранее.См. Здесь («Современная физическая органическая химия» Анслина и Догерти, стр. 23)]

Использование ЯМР, спектроскопии ядерного магнитного резонанса. Эти конформационные изомеры иногда называют «вращательными изомерами» или «ротамерами», и они могут значительно усложнять спектры ЯМР. Пики обычно могут сливаться, нагревая пробоотборный зонд.

Это контрастирует, скажем, с различными стульевыми формами циклогексана, которые, как правило, все еще могут взаимно превращаться при комнатной температуре и сливаться с образованием единственного пика.Однако, если вы достаточно охладите замещенный циклогексан, вы можете «заморозить» различные конформеры и наблюдать за ними по отдельности.

Настоящее время: правильные глаголы -er (первое спряжение) | Изучение французской грамматики

• Если инфинитив во французском языке оканчивается на -er, это означает, что глагол принадлежит первому спряжению, например donner, aimer, parler.
• Чтобы узнать, какую форму глагола использовать во французском языке, вам нужно определить основу глагола, а затем добавить правильное окончание.Основа глаголов -er в настоящем времени образуется путем взятия инфинитива и отсечения -er.

2 говорить, говорить)

Infinitive	Шток (без -er)
donner (отдавать)	donn-
aimer (любить, любить)	aim par
parl-

• Теперь вы знаете, как найти основу глагола, вы можете добавить правильное окончание.Какой из них вы выберете, будет зависеть от того, имеете ли вы в виду je, tu, il, elle, on, nous, vous, ils или elles.

• Для получения дополнительной информации о местоимениях см. Местоимения.

• Вот окончания настоящего времени для глаголов -er:

Местоимение	Окончание	Добавить в основу, например donn-	Значения
je (j ‘)	-e	je donne	Я даю Я даю
tu	-es	tu donnes	you are you are дает
il elle on	-e	il donne elle donne on donne	he / she / it / one дает he / she / it / one is дает
nous	-on	nous donnons	мы даем мы даем
vous	-ez	vous donnez	вы даете вы даете
ellesent		9048 ils donnent elles donnent	они дают они дают

Marie regarde la télé.	Мари смотрит телевизор.
Поезд прибывает à deux heures.	Поезд прибывает в 2 часа.

Типье меняется на j ’перед словом, начинающимся с гласной (a, e, i, o или u), большинство слов начинаются с h, и французское слово y.

• Обратите внимание, что есть несколько обычных глаголов -er, которые пишутся несколько иначе, чем вы могли бы ожидать.

Ключевые моменты

• Глаголы, оканчивающиеся на -er, относятся к первому спряжению и образуют основу своего настоящего времени, теряя -er из инфинитива.
• Окончания глаголов -er в настоящем времени: -e, -es, -e, -ons, -ez, -ent.

PreviousNext

Бактериальная конъюгация — обзор

C Система рекомбинации бактериофага P22

Эксперименты, проведенные Нортоном Зиндером в лаборатории Ледерберга в начале 1950-х годов, были разработаны, чтобы обнаружить, может ли Salmonella typhimurial способствовать конъюгации бактерий. ранее в E . coli (Зиндер, Ледерберг, 1952).Смешивание различных автотрофных мутантов в генах, участвующих в метаболизме аминокислот, с последующим посевом на прототрофов, привело к идентификации одного конкретного штамма (№ 22 в коллекции), который генерировал фенотипы дикого типа с высокой частотой. Неожиданно это привело к открытию бактериофага (теперь называемого P22), который мог осуществлять перенос гена от клетки к клетке — процесс, известный сегодня как вирусная трансдукция. P22 — умеренный бактериофаг S . typhimurium , имеющий циркулярно переставленную и терминально повторяющуюся хромосому (Levine, 1972; Poteete, 1988; Susskind and Botstein, 1978).Одним из ключевых шагов в жизненном цикле фага P22 является циркуляризация инфицирующей линейной хромосомы, чему способствует система рекомбинации фага, действующая на повторяющиеся на концах концы ДНК фага (Weaver and Levine, 1977). Этот механизм циркуляризации отличается от механизма циркуляризации фага λ, где циркуляризация происходит путем отжига перекрывающихся однонитевых сайтов cos (когезионные концы). Это различие делает рекомбинацию важной особенностью биологии P22, чего нельзя сказать о фаге λ.Однако, подобно λ, фаг P22 генерирует конкатемерную ДНК для упаковки (Botstein, 1968). Подобно λ, фаг P22 генерирует хромосомные мультимеры двумя способами: в результате промотируемой фагом рекомбинации между двумя мономерными кругами и в режиме «катящегося круга» репликации ДНК (Gilbert and Dressler, 1968; Weaver and Levine, 1977).

Система рекомбинации P22 состоит из четырех белков: Erf, Abc1, Abc2 и Arf. Функция отжига оцДНК обеспечивается белком Erf ( e ssential r ecombination f unction) (Botstein and Matz, 1970; Poteete, 1982; Weaver and Levine, 1977).Было показано, что белок Erf связывается с оцДНК (Poteete and Fenton, 1983). Учитывая его способность заменяться белком λ-бета при скрещивании фага P22, Erf, скорее всего, обладает функцией отжига оцДНК, аналогичной бета-функции. Erf была первой фаговой рекомбиназой, показавшей кольцеобразную четвертичную структуру на электронных микрофотографиях (Poteete et al ., 1983). Как описано ранее, Erf обнаруживает выступы, исходящие из его колец, которые были идентифицированы как C-концевые домены отдельных субъединиц (Murphy et al ., 1987а). Фрагменты Erf, у которых отсутствует C-концевой домен, все еще могут образовывать кольца, показывая, что эта область белка не требуется ни для образования, ни для стабильности колец (Murphy et al ., 1987a; Poteete et al ., 1983) . Однако C-концевой домен важен для функции рекомбиназы in vivo , поскольку мутанты P22 erf amber, экспрессирующие только N-концевой домен, образующий кольцо, были недостаточны для роста в хозяйском штамме recA . Дальнейший анализ очищенных фрагментов белка Erf показал, что область, важная для связывания оцДНК, расположена между N-концевым доменом, образующим кольцо, и C-концевым доменом с неизвестной функцией (Murphy et al ., 1987а).

В отличие от белка λ Beta, Erf не имеет ассоциированного партнера 5′-3 ‘экзонуклеазы, а также не имеет сопутствующего белка, такого как λ Gam, который связывается с ферментом RecBCD и ингибирует его. Однако удивительно, что эти две функции обеспечивает белок Abc2 ( a nti-rec BC D), который связывается с ферментом RecBCD хозяина и изменяет его функцию экзонуклеазы, так что он работает совместно с Erf, способствуя рекомбинации in vivo (Мерфи, 1994; Мерфи и Льюис, 1993; Мерфи и др. ., 1987b). Фактически, белок RecBCD захватывается Abc2 и заставляет его работать как часть системы рекомбинации P22. Как это достигается, не ясно. Известно, что Abc2 связывается с субъединицей RecC комплекса RecBCD. В анализах, разработанных для измерения in vitro захвата RecBCD в его горячей последовательности Chi (3’GCTGGTGG5 ‘), комплекс Abc2-RecBCD был неспособен распознавать Chi или отвечать на него (Murphy, 2000). (Это ингибирование активности Chi не имеет отношения к рекомбинации P22, поскольку рекомбинация, стимулированная P22, не зависит от Chi.Что еще более важно, модифицированный Abc2 RecBCD все еще обладает экзонуклеазной активностью дцДНК, хотя качественно модифицирован (Murphy, 2000). Переваривание 5’-цепи активируется с помощью Abc2, что очень похоже на нативный вид RecBCD после его встречи с Chi (Dillingham and Kowalczykowski, 2008). Хотя еще не протестировано, одна возможность состоит в том, что Abc2 предотвращает загрузку RecA в сайтах Chi, таким образом объясняя, как экспрессия Abc2 в отдельности ингибирует события конъюгационной рекомбинации, стимулированные RecABCD хозяином. Возможно, что Abc2 препятствует взаимодействию между RecA и RecBCD и, в то же время, позволяет модифицированному ферменту взаимодействовать с белком Erf P22, чтобы способствовать рекомбинации, а также, вероятно, другим SSAP.Это последнее предположение происходит из наблюдения, что коэкспрессия Abc2 с P22 Erf, λ Beta и даже с фагом Pseudomonas D3 SSAP Orf-52 способствует росту мутантов λ red gam в E . coli recA хозяев (К. Мерфи, неопубликованные наблюдения). Эта гипотеза объясняет, почему бета может заменять Erf при инфекции P22, хотя Erf не может заменять бета при инфекции λ (Poteete and Fenton, 1984). Такое дополнение потребует взаимодействия между P22 Erf и λ Exo.Известно, что взаимодействующие партнеры системы RecET профага λ Red и rac не могут заменять друг друга (т. Е. Λ Beta не может работать с RecE, а λ Exo не может работать с RecT для содействия рекомбинации) (Muyrers et al ., 2000). Если экзогенные SSAP фага взаимодействуют напрямую с Abc2-модифицированным RecBCD, это может предполагать, что модифицированный фермент взаимодействует с мотивом, общим для множества SSAP фагов. В качестве альтернативы не требуется прямого взаимодействия между RecBCD, модифицированным Abc2, и сопутствующим SSAP.

Другие компоненты системы P22 играют менее определенную роль, но они необходимы для полного роста и рекомбинации фага P22, удаленного из области его рекомбинации, в хозяевах Salmonella recA . Белок Abc1 был определен как содействующий Abc2 для полного восстановления роста и рекомбинации у мутантов P22, дефицитных для рекомбинации (Murphy and Lewis, 1993; Murphy et al ., 1987b). Однако способность Abc1 взаимодействовать с RecBCD не изучалась. Белок Arf ( a ccessory r ecombination f unction) кодируется небольшой открытой рамкой считывания перед геном erf .Первоначально не ожидалось, что он будет участвовать в рекомбинации из-за его небольшого размера (47 аминокислот), необычно кислой природы предсказанного белка (pI 3,5) и подозрения, что умеренные эффекты делеции, идентифицирующей эту открытую рамку считывания мог просто изменить уровень экспрессии соседнего гена erf (Semerjian et al ., 1989). Тем не менее, фаг P22, содержащий либо делецию в рамке считывания, либо мутацию amber в гене arf , показал 4-5-кратное снижение скорости рекомбинации при скрещивании фага P22, дефект, который может быть дополнен плазмидами, экспрессирующими arf , ген в транс-коде (Poteete et al ., 1991). Учитывая очень кислую природу белка Arf, было высказано предположение, что он может играть роль имитатора ДНК, возможно, помогая вытеснить Erf из оцДНК во время реакции отжига. В этой роли белок Arf может не быть специфичным для системы рекомбинации фага, поскольку его сверхэкспрессия из плазмиды также стимулировала небольшой (2,5-кратный) эффект в рекомбинации фага λ red gam , стимулированной системой рекомбинации хозяина (Poteete et al ., 1991).

Система рекомбинации P22 может способствовать рекомбинации своей хромосомы с помощью любого из механизмов, обсуждаемых ниже для λ Red.Эта точка зрения подтверждается тем фактом, что две системы рекомбинации могут заменять друг друга (Poteete and Fenton, 1984). Однако у P22 есть дополнительная особенность, заключающаяся в том, что рекомбинация важна для его жизненного цикла, поскольку циркуляризация его хромосомы после заражения является предпосылкой для роста (предположительно посредством механизма отжига оцДНК между его окончательно повторяющимися концами). Интересно предположить, что эта особенность жизненного цикла P22 могла продиктовать большую сложность его системы рекомбинации по сравнению с фагом λ (четыре гена P22 по сравнению с двумя генами λ), обеспечивая такой уровень регуляции, который гарантирует, что рекомбинация будет происходить последовательно. вскоре после заражения.Сводка функций рекомбинации фагов лямбда, rac и P22 приведена в таблице I.

Таблица I. Сводка функций рекомбинации фагов

Фаг	Функция отжига	Экзонуклеаза	Anti-RecBCD	Аксессуар функции
λ	Beta	λ Exo	Gam	Rap, Orf
rac	RecT	RecE			Erf не идентифицировано 9048 None идентифицировано 9048	Abc2-modified	Abc2-modified	Arf, Abc1
		RecBCD	RecBCD

Краткое руководство по спряжению глаголов

Глаголы важны, потому что они объясняют, что вы делаете и думаете, представляя действия и образ жизни. Вы также описываете, кто вы есть, с помощью глаголов, которые вы используете. Они также помогают вам вести беседы с другими людьми, с другими людьми.

Изучение спряжения глаголов расширяет ваши разговорные способности, позволяя по-новому описывать себя и других. На этом уроке вы узнаете, как использовать спряжение глаголов, чтобы выразить себя и других, а также их действия или состояние бытия. Вы также узнаете, как письменно и устно рассказать, когда происходит действие, и поймете, как выразить себя в различных ситуациях.

Что такое спряжение глаголов в английском языке?

Спряжение глаголов в английском языке происходит постоянно. Суть спряжения глаголов состоит в том, чтобы сопоставить подлежащее с соответствующим глаголом в зависимости от периода времени. Мы называем это временем. Существует несколько спряжений глаголов, каждый из которых выражает разные периоды времени и используется по-разному в зависимости от контекста. Какой из них вы используете, зависит от сообщения, которым вы хотите поделиться.

Чтобы спрягать глагол, вы добавляете уникальные суффиксы к его базовой форме глагола.Правильный суффикс зависит от человека в предложении, о котором вы говорите, который также известен как субъект предложения.

Существуют также различные суффиксы, которые можно выбрать в зависимости от того, является ли подлежащее единственном или множественном числе, и в зависимости от времени, которое вы обсуждаете.

У каждого глагола есть основная форма, которую вы также можете назвать формой инфинитива. Как правило, форма инфинитива — это основная форма глагола to +. Например, ниже мы будем использовать глагол для работы .

Спряжение глаголов означает изменение глагола в его инфинитивной форме так, чтобы он соответствовал подлежащему в предложении.Некоторые слова имеют стандартный образец, в то время как другие следуют своему собственному уникальному образцу.

Давайте посмотрим на правильный глагол to work в качестве примера. Форма инфинитива этого глагола действия — от до работа . Во время спряжения глаголов он будет изменяться от формы инфинитива в зависимости от грамматического предмета. Это означает, что вы добавляете различные суффиксы к форме инфинитива в зависимости от того, на кого вы ссылаетесь в предложении.

Есть шесть различных точек зрения, которые нужно изучить, каждая со своим суффиксом, основанным на предмете, используемом во время спряжения глаголов.

Прежде чем перейти к различным точкам зрения, почему бы не подготовиться к следующей академической статье? Вот два полезных руководства по формату APA и формату MLA для ознакомления!

Что такое грамматические подлежащие и формы спряжения глаголов?

Первый грамматический предмет называется от первого лица единственного числа . Вы говорите о себе от первого лица в единственном числе. При спряжении глаголов форма первого лица единственного числа использует глагол без каких-либо изменений его суффиксов.Считайте, что это самое простое спряжение глаголов. В примере с по , работа , предложение от первого лица единственного числа будет:

Как указывалось ранее, форма первого лица единственного числа правильной глагольной формы или будущей глагольной формы часто совпадает с простейшей формой глагола. Однако это не всегда верно с неправильными глаголами и словами в будущей форме, например, было или было. Это будет обсуждаться позже в этом руководстве. Посмотрите ниже, чтобы продолжить изучение других предметных форм и примеров их спряжения с глаголами в английском языке.

Далее у вас есть от первого лица во множественном числе . Вы используете эту форму, чтобы говорить о себе и о ком-то еще в спряжении глаголов, которое английский язык использует для описания вас и другого человека, выполняющего одно и то же действие в предложении. В этом случае вместо местоимения I вы используете , мы .

Опять же, это слово действия совпадает с корнем инфинитива, который мы изменим во время спряжения глаголов в других временах. Это будет подчеркнуто позже в руководстве, чтобы отразить напряженное изменение спряжения английских глаголов.

Затем у вас есть во втором лице единственного числа и во втором лице во множественном числе . Вы используете эти категории, когда обращаетесь к человеку или людям, с которыми вы разговариваете или пишете, в стандартном английском использовании спряжения глаголов.

Обычно при спряжении глаголов субъект you отвечает за обращение к одному человеку или группе. В некоторых случаях, исходя из диалекта, вы можете увидеть другие дополнения к фразе помимо обычного спряжения английских глаголов.

Например, вы можете услышать , вы все или , ребята, или даже , вы . Обратите внимание, что они используются только для , говорящего с случайно. Однако в письменной форме как для форм единственного, так и для множественного числа вы используете слово you в спряжениях глаголов.

• Вы работаю . (И единственное, и множественное число.)

Наконец, у вас есть от третьего лица единственного числа и от третьего лица множественного числа в типичном спряжении глаголов в английском языке.Вы используете третье лицо, когда обсуждаете кого-то или что-то еще; или обсуждение группы людей или группы вещей, кроме себя и , кроме человека, с которым вы разговариваете в спряжении глаголов.

В форме третьего лица единственного числа вы относитесь к одному человеку, используя слова он, она, оно, существительное или существительное собственное. Во множественном числе, обращаясь к группе людей, кроме себя, вы используете слово они.

• He / She / It работает .(Единственное число)
• Они работают . (Множественное число)

Как видите, среди всех совпадений подлежащего со всеми спряжениями обычных глаголов единственное изменение происходит с формой единственного числа от третьего лица. Здесь глагол обычно принимает суффикс -s. Это стандартный шаблон с правильными формами глаголов, такими как для работы , что позволяет легко запоминать это спряжение английских глаголов.

В дополнение к шести различным категориям людей, есть также двенадцать разных времен, каждое из которых требует разного спряжения глаголов в зависимости от того, когда происходит действие или состояние.Посмотрите на каждое время и обратите внимание, как суффиксы изменяют форму правильного глагола во время стандартного спряжения. В этом примере мы будем использовать форму первого лица единственного числа, I.

.

1. Простой подарок: Я работаю
2. Simple Past: Я работаю изд
3. Простое будущее: Я буду работать
4. Настоящее время Непрерывно: Я работаю ing
5. Прошлое непрерывное: Я работал ing
6. Future Continuous: Я буду работать ing
7. Настоящее время Совершенно: Работаю изд
8. Прошлое совершенное: Работал изд
9. Future Perfect: Я буду работать ed
10. Настоящее совершенное Непрерывное: Я работал ing
11. Past Perfect Непрерывное: Я работал ing
12. Future Perfect Continuous: Я буду работать ing

Каждое из этих времен в спряжении английских глаголов описывает действие, происходящее в разное время.В стандартном спряжении глаголов в английском языке текущие события происходят прямо сейчас, например, в I или продолжаются. Прошлые события произошли в прошлом, некоторые из которых продолжаются. У вас также есть будущее, которое объясняет, что действия будут происходить в будущем, многие из которых будут продолжаться и дальше в будущем. Вы завершаете спряжение глаголов этих времен, добавляя -ed, -ing, и часто связывающее слово.

Подсказка: убедитесь, что ваша работа или письменное задание выполнено профессионально.Проверьте наличие ошибок с помощью этой удобной программы проверки плагиата. Как только вы определите контент, который может потребоваться цитировать, попробуйте Citation Machine для цитирования справки в формате APA и других стилей.

Почему в языке необходимо спряжение глаголов?

Conjugation дает вашему читателю или слушателю важную справочную информацию. В приведенных выше примерах вы увидели, как использовать слова для описания количества людей или вещей, о которых кто-то говорит, при спряжении глаголов в английской теме. Вы также видели примеры того, как можно определить, когда произойдет действие, в английских временах спряжения глаголов.Кроме того, спряжение глаголов также объясняет, сколько действий было выполнено, пол людей, которые получают действие, и настроение всего предложения.

Примеры спряжения английских глаголов

Теперь вы знаете о регулярных действиях и словах. Чтобы сформировать разные времена, вы добавляете -ed, -d, или -ied к формам прошедшего времени и причастия прошедшего времени. Примеры: прыгнули, улыбнулись, и заплакали.

Обычно окончания глаголов предсказуемы в зависимости от их формы инфинитива.Например, глагол, оканчивающийся на согласный звук, такой как p в слове jump , потребует только окончания -ed , чтобы изменить его время. Глагол smile оканчивается на молчаливую гласную e , поэтому вам нужно только добавить окончание -d , чтобы изменить время.

В последнем примере, кричал , инфинитив заканчивается на y , что звучит как как i . Здесь вы должны отбросить y и заменить его окончанием с концом .Давайте посмотрим на несколько похожих примеров для справки.

• -ed окончания: Work = Work ed ; Rock = Rock ed ; Pack = Pack ed
• -d окончания: Шутка = Шутка d ; Rake = Rake d ; Танец = Танец d
• — ied окончания: Try = Tr ied ; Pry = Pr ied ; Fry = Fr ied

Обратите внимание, что другие слова, оканчивающиеся на y, будут иметь разные окончания, например, молитва становится молитвой или мирянин становится возложенным.Это потому, что многие неправильные формы имеют свои собственные уникальные образцы спряжения глаголов. Это неправильные глаголы, которые имеют разные спряжения английских глаголов, как в этих примерах.

Инфинитив	Простое прошлое	Причастие в прошедшем времени
Купить	Купили	Купили
Есть	Съел	съедено
К началу	Пошел	ушел
Для сна	Спальных	Спальных
Для ношения	Носил	Носил

Как видите, не существует установленного образца спряжения глаголов с неправильными склонениями.Чтобы узнать больше о том, как работают флексии, см. Здесь.

Что такое несовершенное спряжение глаголов? Спряжение несовершенных глаголов часто встречается в спряжениях английских глаголов?

Вы уже довольно много знаете о том, как согласовать глагольные формы с подлежащим (-ми) в предложении. Если вы изучаете английский как второй язык, вы можете задаться вопросом о несовершенном спряжении глаголов.

Хотя технически несовершенного спряжения глаголов не существует в английском языке , некоторые утверждают, что прогрессивное настоящее, также называемое продолжением настоящего, и прогрессивное прошедшее, также называемое непрерывным прошедшим, имеют тот же эффект, что и формы несовершенного спряжения глаголов в романских языках. например, испанский или французский.Как правило, вам нужен контекст с этими формами, как и в романтических языках, но не всегда, поэтому они часто упускаются из виду как потенциально несовершенное спряжение глаголов в английском языке.

Если кто-то спросит вас: «Что вы делали?» Вы можете ответить «Я танцевал. »По-испански вы можете задать тот же вопрос, но если вы ответите с помощью « Я танцевал », вы должны продолжить предложение, чтобы придать ему контекст.

Например:

Я танцевала, когда увидела, что мой парень зашел в клуб.

Предложение «Я танцевал » будет заменено на «Я танцевал» на испанском языке. Однако в английском языке , я танцевал, следует использовать с контекстом, например, «Я танцевал вчера». или «Я танцевал, когда узнал, что выиграл в лотерею». Как и в испанском языке, это кажущееся несовершенным спряжение глаголов можно аргументировать в пользу прошедшего времени на основании потребности в дополнительной информации или контексте, несмотря на то, что это не является непрерывным действием.

Вместо того чтобы спорить о несовершенных формах и их существовании в английском языке, выучите фразу , используемую для . Эта фраза представляет собой действие, которое произошло в прошлом, но, как правило, больше не происходит в прошлом.

Как правило, фраза , используемая для слова , может быть сопряжена с любым подлежащим и не требует каких-либо изменений для выражения этого очень специфического прошедшего, но не настоящего времени. Вы можете использовать его отдельно, например, «Я танцевал раньше», или «Я танцевал раньше, когда был моложе», на вопрос «Ты все еще танцуешь?» Я могу выбирать, давать ли контекст, и время все равно будет пониматься.

носителей английского языка часто используют это в разговорной речи; , используемый для , рассматривается как слишком случайный для академического или профессионального письма. Единственное исключение — когда вы и другой человек знакомы, например, коллеги по работе или друзья. В этом случае вы можете использовать для по электронной почте или тексту.

---

Опубликовано 5 мая 2019 г. Обновлено 14 мая 2020 г.

Полное руководство по спряжению Estar на испанском языке

В этом уроке вы узнаете все, что вам нужно знать о спряжении estar в испанском языке и о том, как спрягать глагол estar во всех временах испанских глаголов.Конъюгация estar нерегулярна, потому что она не следует установленной схеме конъюгации. Мы также уделим особое внимание спряжению estar в повелительном наклонении, поскольку оно отличается от многих испанских глаголов.

Как спрягать

Estar на испанском языке

Согласно RAE, королевскому институту, курирующему испанский язык, в испанском языке 16 глагольных времен. Сегодня мы спрягаем для вас глагол estar во всех его формах! Начнем со словесных.

Испанские глаголы от Estar

Глаголы не являются глаголами. Это слова, образованные от глаголов и функционирующие как существительные или модификаторы. Это испанские глаголы estar .

Инфинитив : estar

Герунд : estando

Причастие : estado

Ориентировочное настроение

Испанское изъявительное наклонение состоит из 10 испанских времен. «Tiempos simples» относится ко всем тем временам испанских глаголов, в которых глагол «haber» не используется, а «tiempos compuestos» относится ко всем тем временам, в которых используется вспомогательный глагол «haber».

Tiempos Simples — Простые времена

Presente — Настоящее время

• лет эстой — я
• tú estás — вы
• vos estás — вы (Южная Америка)
• él / ella / usted está — он / она / вы (формально)
• nosotros / as estamos — мы
• vosotros / as estáis — вы (множественное число)
• ustedes están — вы (множественное число)
• ellos / as están — они

Pretérito Imperfecto — Несовершенное время

• лет aba — мне было
• tú createda — вы были
• vos installedas — вы (южноамериканцы) были
• él / ella / usted installeda — он / она / вы (формально) были
• nosotros / as est ábamos — мы были
• vosotros / as installed — вы (множественное число) были
• ustedes createdan — вы (множественное число) были
• эллос / как установлено — они были

Pretérito Perfecto — Preterite Tense

• лет уве — мне было
• tú est uviste — вы были
• vos est uvo — вы (южноамериканец) были
• él / ella / usted est uvo — он / она / вы (формально) были
• nosotros / as est uvimos — мы были
• vosotros / as est uvisteis — вы (множественное число) были
• ustedes est uvieron — вы (множественное число) были
• ellos / as est uvieron — они были

Futuro — будущее время

• yo est aré — мне будет
• tú est arás — вам будет
• vos est arás — вам (южноамериканец) будет
• él / ella / usted est ará — он / она / вы (формально) будет
• носотрос / as est aremos — мы будем
• vosotros / as est aréis — вам (множественное число) будет
• ustedes est arán — вам (множественное число) будет
• ellos / as est arán — они будут

Condicional — Условное время

• yo est aría — мне было бы
• tú est arías — вам будет
• vos est arías — вам (южноамериканец) будет
• él / ella / usted est aría — он / она / вы (формально) будет
• nosotros / as est aríamos — мы будем
• vosotros / as est aríais — вам (множественное число) будет
• ustedes est arían — вам (множественное число) будет
• ellos / as est arían — они будут

Tiempos Compuestos — Составные времена

Pretérito Perfecto Compuesto — Preterit (Настоящее время) Perfect Tense

• yo estado — Мне было
• tú has estado — вы были
• vos has estado — вам (южноамериканец) было
• él / ella / usted ha estado — он / она / вы (официально) были
• nosotros / as hemos estado — мы были
• vosotros / as habéis estado — вы (множественное число) были
• ustedes han estado — вы (множественное число) были
• ellos / as han estado — они были

Pretérito Pluscuamperfecto — Pluperfect Tense

• yo había estado — Мне было
• tú habías estado — вам было
• vos habías estado — вам (южноамериканец) было
• él / ella / usted había estado — он / она / вы (формально) был
• nosotros / as habíamos estado — мы были
• vosotros / as habíais estado — вы (множественное число) были
• ustedes habían estado — вам (множественное число) было
• ellos / as habían estado — они были

Pretérito Anterior — Preterit Perfect Tense

• yo hube estado — Мне было
• tú hubiste estado — вам было
• vos hubiste estado — вам (южноамериканец) было
• él / ella / usted hubo estado — он / она / вы (формально) был
• nosotros / as hubimos estado — мы были
• vosotros / as hubisteis estado — вы (множественное число) были
• ustedes hubieron estado — вам (множественное число) было
• ellos / as hubieron estado — они были

Futuro Compuesto — Future Perfect Tense

• yo habré estado — мне будет
• tú habrás estado — вам будет
• vos habrás estado — вам (южноамериканец) будет
• él / ella / usted habrá estado — ему / ей / вам (формально) будет
• nosotros / as habremos estado — у нас будет
• vosotros / as habréis estado — вам (множественное число) будет
• ustedes habrán estado — вам (множественное число) будет
• ellos / as habrán estado — они были

Condicional Compuesto — Условное совершенное время

• yo habría estado — мне было бы
• tú habrías estado — вам было бы
• vos habrías estado — вам (южноамериканец) было бы
• él / ella / usted habría estado — он / она / вы (формально) было бы
• nosotros / as habríamos estado — мы бы были
• vosotros / as habríais estado — вам (множественное число) было бы
• ustedes habrían estado — вам (множественное число) было бы
• ellos / as habrían estado — они были бы

Слагательное наклонение

Как мы узнали ранее, сослагательное наклонение раскрывает точку зрения говорящего. В испанском сослагательном наклонении есть 6 времен испанских глаголов. Вот они!

Tiempos Simples — Простые времена

Presente — Настоящее время

• лет é — мне
• tú est és — вы будете
• vos est és — you (South American) be
• él / ella / usted est é — он / она / вы (формально) быть
• носотрос / as est emos — мы будем
• vosotros / as est éis — you (множественное число) быть
• ustedes est én — you (множественное число) быть
• ellos / as est én — они будут

Pretérito Imperfecto — Несовершенное время

• yo est uviera (or est uviese ) — мне было
• tú est uvieras (or est uvieses ) — вы были
• vos est uvieras (or est uvieses ) — вы (южноамериканец) были
• él / ella / usted est uviera (or est uviese ) — он / она / вы (формально) были
• nosotros / as est uviéramos (or est uviésemos ) — мы были
• vosotros / as est uvierais (or est uvieseis ) — вы (множественное число) были
• ustedes est uvieran (or est uviesen ) — вы (множественное число) были
• ellos / as est uvieran (or est uviesen ) — они были

Futuro — будущее время

• yo est uviere (без прямого перевода на английский язык)
• tú est uvieres
• vos est uvieres
• él / ella / usted est uviere
• nosotros / as est uviéremos
• vosotros / as est uviereis
• ustedes est uvieren
• ellos / as est uvieren

Tiempos Compuestos — Составные времена

Pretérito Perfecto Compuesto — Preterit (Настоящее время) Perfect Tense

• yo haya estado — Я был
• tú hayas est ado — вы были
• vos hayas est ado — вы (южноамериканец) были
• él / ella / usted haya est ado — он / она / вы (формально) были
• nosotros / as hayamos est ado — мы были
• vosotros / as hayáis est ado — вы (множественное число) были
• ustedes hayan est ado — вы (множественное число) были
• ellos / as hayan est ado — они были

Pretérito Pluscuamperfecto — Pluperfect Tense

• yo hubiera (or hubiese) est ado — мне было
• tú hubieras (или hubieses) est ado — вам было
• vos hubieras (или hubieses) est ado — вам (южноамериканец) было
• él / ella / usted hubiera (или hubiese) est ado — он / она / вы (формально) был
• nosotros / as hubiéramos (или hubiésemos) est ado — мы были
• vosotros / as hubierais (или hubieseis) est ado — вам (множественное число) было
• ustedes hubieran (или hubiesen) est ado — вам (множественное число) было
• ellos / as hubieran (или hubiesen) est ado — они были

Futuro Compuesto — Future Perfect Tense

• yo hubiere est ado (без прямого перевода на английский язык)
• tú hubieres est ado
• vos hubieres est ado
• él / ella / usted hubiere est ado
• nosotros / as hubiéremos est ado
• vosotros / as hubiereis est ado
• ustedes hubieren est ado
• ellos / as hubieren est ado

Императивное настроение

Формы глагола estar , встречающиеся в испанском повелительном наклонении, выражают порядок. Вы можете формировать отрицательные и положительные высказывания в испанском повелительном настроении. Давайте узнаем об этом больше!

Положительные императивные утверждения с Estar

Повелительное наклонение глагола estar используется с испанскими возвратными местоимениями. Что это значит? Давайте спрягаем estar в повелительном настроении, чтобы выяснить это!

• tú esta te — будьте
• vos estate — you (южноамериканский) be
• usted estese — вы (формально) будьте
• ustedes esten se — you (множественное число) быть
• vosotros estad (возвратное местоимение не требуется)

Окончания «те» и «се» являются испанскими возвратными местоимениями.Не забывайте добавлять их, когда используете estar для команд. Теперь давайте посмотрим, как повелительное наклонение estar используется в обычных выражениях.

• Карен, поместье каллада. (Карен, молчи.)
  Карен, está callada. (неверно)
• Señor, estese tranquilo. (Сэр, успокойтесь.)
  Señor, esté tranquilo. (неверно.)
• Chicos, estense alerta. (Ребята, будьте начеку.)
  Chicos, esténalerta. (неверно)
• Por Favor, (vosotros) estad a tiempo.(Пожалуйста, приходите вовремя.)

Отрицательные императивные утверждения с Estar

Для подачи отрицательных команд необходимо использовать следующие формы estar . Вам не нужно использовать возвратные местоимения для создания отрицательных предложений.

• tú no estés — не будь
• vos no estés — вам (южноамериканец) не быть
• usted no esté — вам (формально) не быть
• ustedes no estén — you (множественное число) не должно быть
• vosotros no estéis — вы (множественное число) не должны быть

Мы много говорили о спряжении estar, , но есть еще кое-что, что вам нужно знать об этом популярном испанском глаголе. Давай выясним.

Глагольные фразы с Estar

В испанском языке есть нечто, называемое «perífrasis verbal» (глагольная фраза). Глагол estar появляется только в двух разных типах глагольных фраз: в глагольных фразах, содержащих испанские причастия настоящего времени, и в глагольных фразах, содержащих испанские причастия прошедшего времени. Посмотрим.

Estar + испанские причастия настоящего

Эта конкретная глагольная фраза выражает непрерывное действие.Многие называют это испанским прогрессивным временем. Чтобы сформировать эту фразу, вам понадобится глагол estar и испанское причастие настоящего.

• Йо эстой корриендо. (Бегу.)
• Tú estuviste corriendo. (Вы бежали.)
• Él estará corriendo. (Он будет работать.)
  

Да, вы можете использовать любое испанское время глагола для образования этой глагольной фразы. Будем практиковаться? Переведите следующие английские выражения на испанский.Используйте правильную форму глагола estar .

• Я сейчас пью кофе.
• Я писал письмо вчера в 8 часов.
• Я изучаю испанский язык.

Как это было? Вы можете проверить свои ответы здесь.

• Estoy bebiendo cafe en este momento.
• Estaba escribiendo una carta ayer a las 8 en punto.
• He estado estudiando español.

Estar + испанские причастия прошедшего времени

Эта глагольная фраза образована глаголом estar и испанским причастием прошедшего времени.Причастия прошедшего времени в испанском языке — это глаголы, оканчивающиеся на «адо» или «идо». Вот некоторые общие выражения с этой глагольной фразой.

• Estoy perdido. (Я заблудился.)
• El carro está arruinado. (Автомобиль разрушен.)
• Él está acostado. (Лежит.)

Вы также можете использовать эту испанскую глагольную фразу в разных временах по-испански! Давайте посмотрим на несколько примеров использования этой глагольной фразы в настоящем, прошедшем и будущем времени.

• Ella está arrepentida.(Она сожалеет.)
• Ellos устанавливает preocupados. (Они волновались.)
• Tu madre estará impresionada cuando escuche las noticias. (Ваша мать будет впечатлена, когда услышит эту новость.)

Практика спряжения Estar

Если вы хотите правильно спрягать глагол estar в испанском языке, вам нужна регулярная практика. В этом вам может помочь Clozemaster. Завершите следующие предложения правильной формой глагола estar .

Общие вопросы о

Estar

1. Что означает глагол

estar ?

Два испанских глагола эквивалентны английскому глаголу быть. Estar является одним из таких эквивалентов. Йо эстой значит я. Estar , однако, используется в разных контекстах и ​​иногда может даже означать «внешний вид» или «вкус».

2. Как используется причастие прошедшего времени

estar ?

Причастие прошедшего времени estar — estado. Estado встречается во всех испанских совершенных временах. В испанском языке эти времена называются «tiempos compuestos», и все они имеют вспомогательный глагол haber.

3. Является ли

estar правильным или неправильным глаголом?

Estar — неправильный глагол. Это нерегулярно, потому что оно не следует установленному образцу спряжения, чтобы сформировать его различные времена.

Щелкните здесь, чтобы прочитать наше исчерпывающее руководство по всем временам испанского языка!

Подробнее о

Estar

Теперь вы знаете все, что нужно знать о спряжении estar, b , но знаете ли вы, как его использовать? Не забудьте проверить использование estar , если вы еще не знаете их.

Практика спряжения estar и сотен других испанских глаголов в контексте Clozemaster!

Все о спряжении «Ver» на испанском языке

Видеть или не видеть, это… о, подожди, это не так — неважно… Ну, возможно, у него не такая известная репутация, как «быть», но «видеть» все еще важный глагол — да, и в испанском тоже! Сегодня мы рассмотрим этот глагол ver и посмотрим, как он работает на испанском языке, какие формы принимает и чем отличается от английского эквивалента.

Словесные формы ver

Чтобы использовать ver в предложении, вы должны либо спрягать его, либо использовать глагол. Давайте начнем с того, что посмотрим, как три глагола работают с этим глаголом.

Инфинитив:

ver (чтобы увидеть)

Пример: Mi hermano no me quiere ver. | Мой брат не хочет меня видеть.

Герундий:

вид (видение)

Пример: El peque está viendo televisión. | Малыш смотрит телевизор.
Подробнее о том, как использовать герундий, читайте в нашем справочнике по спряжениям estar.

Причастие:

visto (просмотрено)

Пример: Yo nunca había visto eso en toda mi vida. | Я никогда не видел этого за всю свою жизнь.
Объяснение этой структуры см. В нашей статье о том, как использовать haber.

Примечание: — это не то же самое слово, что и vista , существительное, означающее «вид».

Ver спряжение: основные формы

Наиболее распространенными формами спряжения и являются следующие:

Тема	Настоящее время	Претерит	Будущее	Несовершенное
лет	veo	vi	версия	виа
tú	ves	человек	версия	вид
él, ella, Usted	и	фиолетовый	версия	виа
носотрос	vemos	vimos	вермос	вид
восотрос	veis	visteis	версия	вид
эллос, эллас, устедес	вэн	vieron	версия	вейан

Примеры спряжения

и в настоящем времени

• Veo que tú no me quieres ayudar. | Я вижу, ты не хочешь мне помогать.
• Nos vemos todos los días. | Видимся каждый день.
• ¿ Veis que así no se va a arreglar nada? | Вы видите, что таким образом ничего не исправят?

Настоящее время глагола ver почти полностью правильное. Если вы знаете правильную конструкцию -er, вам не составит труда вспомнить, как спрягать и в настоящем времени.Единственное отличие — это дополнительный -e, который появляется в сопряженных формах. Если вам нужно освежить в памяти эти обычные формы, ознакомьтесь с нашим исчерпывающим руководством по спряжению на испанском языке!

Примеры спряжения

и в прошедшем претеритном времени

• Vi que él createda con otra mujer. | Я видел, что он был с другой женщиной.
• Maria Luisa vio que no iba a poder hacer a Juan Paolo cambiar de idea. | Мария Луиза понимала, что ей не удастся заставить Хуана Пабло передумать.
• Todos vieron que José ya no quería estar allí. | Все видели, что Хосе больше не хотел там находиться.

Прошлый претерит, вероятно, является наиболее нерегулярным из всех конъюгаций и , так что хорошо потратить немного больше времени на это.

Примеры спряжения

ver в будущем времени

• Voy a ser el jefe algún día, ya verás . | Когда-нибудь я стану боссом, вот увидите.
• Ella no está arrepentida ahora, pero pronto verá que yo soy la persona para ella. | Сейчас она не сожалеет, но скоро она увидит, что я для нее человек.
• Cuando lleguemos en la cima del monte, veremos el paisaje de toda la región. | Когда мы доберемся до вершины холма, мы увидим пейзаж всего региона.

Это одна из частей спряжения и , которая является полностью регулярной — без исключений!

Примеры спряжения

ver в прошедшем несовершенном времени

• Cuanto más hablé con ella, más veía que negociar era imposible. | Чем больше я с ней разговаривал, тем больше понимал, что вести переговоры невозможно.
• Elisa era una mujer muy agradable, pero veía los negocios como si fueran un juego, y eso no age is aceptable. | Элиза была очень хорошей женщиной, но она рассматривала бизнес как игру, а это было неприемлемо.
• En esa época, eramos jóvenes y libres, y se nos veían como niños. | В то время мы были молоды и свободны, и нас считали детьми.

Ver конъюгация: Расширенные формы

Тема	Настоящее сослагательное наклонение (что вы) см.	Несовершенное сослагательное наклонение (если я) видел…	Условный (I) увидел бы
лет	веа	Вьера	версия
tú	веас	vieras	версия
él, ella, Usted	веа	Вьера	версия
носотрос	veamos	viéramos	версия
восотрос	человек	vierais	версия
эллос, эллас, устедес	виан	виеран	версия

Примеры конъюгации

и в настоящем сослагательном наклонении

• Yo quiero que tú veas lo que hiciste. | Я хочу, чтобы вы увидели, что вы сделали.
• Pinté el cuadro así para que se vea bien los colores. | Я нарисовал картину вот так, чтобы вы хорошо видели цвета.
• Cuando mis padres vean el desorden aquí, te van a castigar. | Когда мои родители увидят здесь беспорядок, они тебя накажут.

Примеры конъюгации

и в несовершенном сослагательном наклонении

• Si tú vieras lo que yo vi, tú también estarías con miedo. | Если бы вы увидели то, что видел я, вы бы тоже испугались.
• El profesor quería que nosotros vieramos la película El Hijo. | Учитель хотел, чтобы мы посмотрели фильм « Сын ».
• Me gustó que ustedes vieran lo importante que es este evento. | Мне понравилось, что вы все увидели, насколько важным было это мероприятие.

Примеры спряжения

и в условном настроении

• Si yo pudiera, vería a mi novia todos los días. | Если бы я мог, я бы видел свою девушку каждый день.
• Si María supiera lo que he hecho, seguro que me vería . | Если бы Мария знала, что я сделал, она бы наверняка увидела меня по-другому.
• No sabía que veríamos toda la información ya. | Я не знал, что сейчас мы увидим всю информацию.

Краткие заметки по использованию версии

Чтобы увидеть / увидеть

Во многих случаях, когда мы использовали бы слово can на английском языке, эквивалент на испанском языке опускается.Обычно это врожденная способность, например, пять чувств. Итак, если вы находитесь в задней части толпы на концерте на испанском языке и не можете видеть сцену, это быстрее, эффективнее и гораздо более распространено сказать: «Нет вео, нет вео».

Сравнение просмотра и просмотра

Глагол ver означает видеть , просматривать и смотреть одновременно, поэтому его применение в испанском языке гораздо шире, чем в любом из английских переводов.Однако будьте осторожны с mirar . Некоторые учащиеся путают эти два слова и используют mirar вместо ver. Распространенной ошибкой является использование mirar для просмотра ТВ, фильмов и т. Д., Хотя на самом деле в таких случаях всегда должно быть или .

---

Надеюсь, эта статья прояснила спряжение ver в испанском языке и использование глагола «ver». Помните, что ver является неправильным, поэтому то, что верно для этого глагола, не обязательно верно для других глаголов.Если вы хотите увидеть, как спрягаются обычные глаголы, или просто хотите освежить свои знания о различных временах, обязательно ознакомьтесь с нашим обзором времен на испанском языке, в котором есть вся необходимая информация.

Не забудьте использовать Clozemaster, чтобы попрактиковаться в испанских предложениях и проверить свои знания испанской грамматики!

Испытайте себя с Clozemaster

Проверьте свои навыки и узнайте, что вы узнали из этой статьи, проиграв несколько предложений со спряженными формами испанского глагола ver :

Зарегистрируйтесь здесь, чтобы сохранить свой прогресс и начать бегло говорить с тысячами предложений на испанском в Clozemaster.

Clozemaster был разработан, чтобы помочь вам изучать язык в контексте, заполняя пробелы в аутентичных предложениях. Благодаря таким функциям, как Grammar Challenges, Cloze-Listening и Cloze-Reading, приложение позволит вам подчеркнуть все навыки, необходимые для свободного владения испанским языком.

Поднимите свой испанский на новый уровень. Нажмите здесь, чтобы начать практиковаться с настоящими испанскими предложениями!

Конъюгация

: метод передачи устойчивости к ампициллину от донора к реципиенту E.coli

Бактериальные клетки, такие как E. coli, способны передавать генетическую информацию от клетки к клетке. Конъюгация отличается от других механизмов передачи ДНК, таких как трансдукция или трансформация, тем, что требует физического контакта между клетками.

Для продолжения конъюгации требуется донорская клетка, которая выражает фертильность, или фактор F, и реципиентная клетка без него, F минус клетка. Процесс требует двух шагов. Первый — это установление прямого межклеточного контакта.Для этого донорская клетка создает внеклеточную нитевидную структуру, называемую половым ворсом. Это названо так, потому что конъюгация — это форма спаривания для бактерий, размножающихся бесполым путем, но следует отметить, что это не настоящее половое размножение, поскольку не происходит обмена гамет и образования потомства.

Второй шаг — доставка ДНК к клетке-реципиенту. После того, как половая пильчатка устанавливает контакт между двумя клетками, создается канал, называемый системой секреции типа IV, позволяющий переносить ДНК.Затем донорская клетка начинает реплицировать внехромосомную ДНК, которая будет перенесена, выбранная на основе присутствия генетического элемента, известного как OriT или источник переноса. Один конец вновь реплицированной ДНК вводится в канал посредством связывания с ДНК-белком. По мере дальнейшей репликации ДНК она прокачивается через канал, чему способствует комплекс белков, кодируемых генами, расположенными рядом с OriT. Как только ДНК будет полностью перенесена, она либо образует дополнительную хромосомную плазмиду, либо может интегрироваться в хромосому клетки-реципиента.Какова бы ни была конечная точка перенесенной ДНК, тогда будут экспрессироваться гены, которые она кодирует. Эту экспрессию гена можно использовать для подтверждения успешной конъюгации.

Например, рассмотрим сценарий, в котором штамм-донор проявляет устойчивость к ампициллину и передает это в конъюгированной ДНК бактерии-реципиенту, но штамм-реципиент также имеет ген устойчивости к тетрациклину, которого нет у донора. В этом случае, когда клетки высевают на среду LB, содержащую как тетрациклин, так и ампициллин, колонии должны расти только из успешно конъюгированных бактерий, которые будут экспрессировать оба фенотипа устойчивости.Для дальнейшего подтверждения успешной конъюгации можно собрать плазмидную ДНК из этих колоний, а затем амплифицировать участок ДНК, специфичный для перенесенной плазмиды, с использованием полимеразной цепной реакции или ПЦР. Когда продукт ПЦР запускается в геле для электрофореза вместе с лестницей стандартных размеров, на геле должен быть виден фрагмент ПЦР известного размера, что дополнительно подтверждает успешное конъюгацию. В этом эксперименте плазмида будет использоваться для переноса гена устойчивости к ампициллину путем конъюгации от штамма-донора к штамму-реципиенту, устойчивому к тетрациклину.После этого для подтверждения конъюгации смесь для конъюгации инкубируют на планшете, содержащем оба антибиотика, оставляя только трансформированные бактерии. Наконец, успешная конъюгация будет дополнительно подтверждена с помощью ПЦР.

Перед началом процедуры наденьте соответствующие средства индивидуальной защиты, включая лабораторный халат и перчатки. Затем простерилизуйте рабочее место, используя 70% этанол, чтобы протереть поверхность.

В этой процедуре ген устойчивости к ампициллину будет перенесен из штамма WM3064 E.coli со штаммом E. coli J53 посредством конъюгации. Донорский штамм WM3064 устойчив к тетрациклину и ампициллину, и для роста ему требуется диаминопимелиновая кислота или DAP. Штамм-реципиент J53 устойчив только к тетрациклину и не требует для роста DAP. Это означает, что успешно конъюгированные клетки должны быть устойчивы к тетрациклину и ампициллину и могут расти без DAP.

Подготовьте культуру донорского штамма, засевая пять миллилитров LB, содержащего 0,3 миллимоля DAP, с остатком замороженного исходного глицерина донорского штамма.Затем подготовьте штамм-реципиент, засевая пять миллилитров бульона LB без DAP с кусочком замороженного исходного глицерина штамма-реципиента. Выращивайте эти культуры в течение ночи при 37 градусах Цельсия с аэрацией и встряхиванием при 220 об / мин в инкубаторе с встряхиванием. Как только культуры вырастут до OD 600, равного двум, удалите по одному миллилитру культуры из каждой и поместите его в две новые отдельные 1,5 миллилитровые микроцентрифужные пробирки. Затем центрифугируйте эти аликвоты при 3000 об / мин в течение пяти минут для осаждения бактериальных клеток. Удалите супернатант и промойте каждый осадок 250 микролитрами 1X PBS. Снова центрифугируйте образцы и после удаления супернатанта ресуспендируйте каждый осадок в 500 микролитрах PBS.

Чтобы начать процедуру конъюгации, сначала объедините 50 микролитров реципиентных клеток с 50 микролитрами донорских клеток в 1,5-миллилитровой микроцентрифужной пробирке и осторожно перемешайте пипеткой вверх и вниз. Затем пипетируйте 100 микролитров культуры клеток-реципиентов на другой планшет с тетрациклином 1X, содержащий DAP.Затем подготовьте отрицательный контроль, нанеся пипеткой 100 микролитров культуры клеток-реципиентов на неселективный агаровый планшет, содержащий DAP. Затем инкубируйте планшеты для конъюгации и отрицательного контроля в течение ночи при 37 градусах Цельсия.

На следующий день возьмите стерильный скребок для клеток и соберите клетки с планшета для конъюгации путем сбора колоний. Затем перенесите колонии в стерильную 1,5-миллилитровую микроцентрифужную пробирку, содержащую один миллилитр 1X PBS. Повторите этот процесс, чтобы собрать клетки-реципиенты из другой чашки.

После этого перемешайте образцы на вортексе. После смешивания перенесите пробирки в центрифугу, чтобы аккуратно осаждать клетки. Удалите супернатант, затем промойте осадок клеток в одном миллилитре PBS и встряхните пробирки, чтобы ресуспендировать клетки. Снова осаждают клетки центрифугированием. Снова слейте супернатант и ресуспендируйте оба осадка клеток в одном миллилитре PBS. Теперь, используя стерильный наконечник пипетки, поместите 100 микролитров смеси клеток для реакции конъюгации на чашку с агаром LB без DAP, содержащую 1X тетрациклин и 1X ампициллин.Повторите метод посева, используя 100 микролитров десятикратного разведения той же смеси клеток в PBS, на другую пластину с агаром LB без DAP, содержащую 1X тетрациклин и 1X ампициллин.

Наконец, внесите пипеткой 100 микролитров смеси отрицательных контрольных клеток на одну чашку с агаром LB только с 1X тетрациклином. После инкубации в течение ночи при 37 градусах Цельсия колонии должны быть видны. С помощью стерильного наконечника пипетки выберите одну колонию из планшета для реакции конъюгации и добавьте ее в пробирку, содержащую пять миллилитров селективной среды LB, содержащей оба антибиотика.Затем повторите выделение колонии, выбрав одну колонию из планшета с клетками-реципиентами. Выращивайте эти культуры в течение ночи при 37 градусах Цельсия с аэрацией при 220 об / мин.

На следующий день протрите стол 70% этанолом и выньте чашки из инкубатора. Используйте мини-набор для подготовки ДНК для выделения ДНК из 4, 5 мл каждой культуры в соответствии с инструкциями производителя. После завершения мини-приготовления ДНК элюируйте ДНК, используя 35 микролитров воды, свободной от нуклеаз. Наконец, используйте оставшиеся 0.5 миллилитров каждой культуры для приготовления одного миллилитра глицерина, добавляя 0,5 миллилитра 100% глицерина для разведения один к одному. Поместите эти аликвоты при температуре минус 80 градусов Цельсия для хранения, пока они не понадобятся.

Чтобы подтвердить успешное конъюгирование с помощью ПЦР, сначала приготовьте мастер-микс для ПЦР, добавив 75 микролитров 2-кратного мастер-микса для ПЦР в пробирку для микроцентрифуги. Затем добавьте по 7,5 микролитров каждый из 10-микромолярного прямого праймера и 10-микромолярного обратного праймера, предназначенного для амплификации гена устойчивости к ампициллину из плазмиды.Затем приготовьте второй мастер-микс для ПЦР, добавив 75 мкл мастер-микса 2X PCR в пробирку для микроцентрифуги, а затем добавив по 7,5 мкл каждый из 10-микромолярного прямого праймера и 10-микромолярного обратного праймера, предназначенного для амплификации гена домашнего хозяйства, в данном случае ДНК-гиразы. B.

Теперь добавьте 15 микролитров первого мастер-микса в пробирку для ПЦР, а затем добавьте 10 нанограммов, примерно два микролитра матрицы экспериментальной ДНК в ту же пробирку. Доведите реакцию до конечного объема 25 микролитров водой, свободной от нуклеаз.